原因很多，要逐步排除，首先看压力问题，进样，和柱子

发生这种情况,最有可能的还是流动相配错了.不然即使柱子柱效低了.也是峰型变差或者分叉,保留时间不可能差3倍.
或者样品有问题,有漏液发生导致流量变慢.
但最有可能的还是流动相配置错误

以前也遇到过这种情况，不知道怎么回事。

保留时间一般不会相差太多，如果是同样的条件！之前有遇到就是和同事穿插着做样品时，因为头一天冲洗的不够，导致我第二天做的时候保留时间推迟了近5分钟，但还好！如果是做样都没有变化的话，那就是流动相配错的可能性比较大！

什么都没变，这么大的差异，不太可能的。就象我们，每次出现问题第一反应就时我是一样做的，什么都没变。其实其中的变化不知有多少。可以将原来5分钟的样品和现在的样品同时配制依次进样分析，看会出现什么结果。如果和现在的结果比较接近，最大的可能性是流动相变化了，把瓶子里的流动相都换掉，重新准备再看一下，希望会有所发现，反正我是上过这么一次当的。

个人觉得可能的原因：
1、流动相配制可能有问题，导致洗脱强度减弱，保留时间延长
2、柱子没有平衡好。
建议重新正确配制流动相，先给柱子平衡一段时间后再进样试试

同意楼上的说法，流动相的pH确实对峰的保留时间影响比较大。

流动相的可能性大
主要是有机相和水相的比例
是不是拿错了
重新用新试剂配一下

也可能是有地方漏

应助达人

流动相组成、pH是否稳定、温度如何？

保留时间是逐渐变化还是突然变化？

大概是什么分析？样品性质如何？