zxhcnf
第12楼2010/02/25
PITC 柱前衍生法,通常走的是梯度,走梯度是没有必要用水性柱的,因为它的梯度设定中有机相比例的会随着时间的延长变大,也就是说,分析过程中不是持久的纯水相条件,至少有较长的一段时间流动相中有机的比例大于10%,这种情况下是没有必要用水性C18柱的。
这里我解释一下,什么情况下才需要用水性C18柱(我们公司对映的是AQ-C18),由于常规的C18柱(如我们的XB-C18)在水相比例大于90%的条件下容易产生相塌陷(就是保留时间越来越短的现象,注意区别柱头塌陷),为克服这个缺陷,使得水相和有机相的所有比例范围内都能使用,因而开发了水性柱。也就是说只有长时间(>2小时)的用水相大于90%或95%的流动相作流动相时,相塌陷才会产生,短时间内是不会的。所以,“PITC柱前衍生,水性C18柱”这个说法本身没有错,因为它确实也可以用水性柱来做,可能他们做实验的结果表明用水性C18更合适,因此推荐用他们的水性C18。但是,要是说“必须用水性C18”来做这是不对的。
zcp915
第19楼2011/08/10
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Waters 的UPLC 通常用的色谱柱填料粒径是1.7um的短柱子,由于色谱柱短,所以分析速度快,但压力也很高。
Waters的方法包针对的是一个特定的体系,也就是说是专门针对这款柱子开发的方法,将方法包转移到其它色谱柱上是需要调整的。
事实上很多C18的柱子都可以用于氨基酸的分析,而且也有很多方法可以供选择,比如用异硫氰酸苯酯来做衍生化试剂。您不想购买他们的方法包,可以试用一下我们的Ultimate XB-C18,5um,4.6×250mm的柱子,分析方法如下:
能不能麻烦您把Ultimate XB-C18,5um,4.6×250mm的柱子的具体方法和信息发给我一下,我最近也要用:zcp915@126.com