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  • 毛毛儿

    第11楼2010/04/20

    应助工程师

    能分开肯定都不喜欢用缓冲盐溶液啊!流动相配置和冲洗都比较麻烦!

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  • 快乐

    第12楼2010/04/20

    应助达人

    此物质对PH敏感,否则,楼主还要进行更多的因素调试。

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  • chqiu111111

    第13楼2010/04/20

    是啊,是对ph敏感,你的意思是说还要什么因素的调试?

    快乐(ynsfeed) 发表:此物质对PH敏感,否则,楼主还要进行更多的因素调试。

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  • lingshike

    第14楼2010/04/20

    有个DAD就是好啊。

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  • zxhcnf

    第15楼2010/04/21

    从定量分析的角度,这么长的柱子出峰在5min之前的通常都不能算是真正的峰,因为这些峰出峰都太快了很容易引起杂质的干扰。但为了监测反应,目的是观察几个峰的相对大小,而且监测是即时进行的,需要很快出结果,否则峰还没出来反应也许已经结束,那就失去了监测的意义了。

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  • swallow_zhyan

    第16楼2010/04/21

    现在市面上的柱子pH耐受性好的也不少,极限柱pH范围1.5-10,一般也够用了。不过保养也是很重要滴。
    DAD 确实是好东西。

    qingqingcao(qingqingcao) 发表:分离度不错。但是使用pH=8的缓冲液似乎太高了,伤色谱柱。
    同时柱温对分离没有什么帮助,只是温度升高,柱压会降低些。
    流速一般在0.8-1.4之间。
    检测波长用DAD 确实很方便。我02年用的还是比较老土的DAD。没有3D的。
    确实使用杂质吸收少的主峰吸收的可以排除许多干扰,这是UV-VIS 的优势之一。我也用过该方法。

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  • zxhcnf

    第17楼2010/04/21

    首先非常感谢您和我们一起分享您的经验。谢谢!在这里我也要跟楼主提几个建议,一是,您的这个谱图和后面总结内容上标识的出峰时间好像不太一致,对了半天,我眼睛都花了也没整明白呵呵。。如果对映好了会更好。
    二.方法开发的时候不宜频繁的更换缓冲盐的体系,这样很多规律性的东西都不太好掌握,特别是pH的变化,有时候对保留时间会有很大的影响。
    三.甲醇和乙腈体系是有差别的,大致可以预测的是,乙腈的洗脱能力比甲醇强,至于它们的选择性哪一个更适合您的样品要看运气了,但至少从一个体系换至另一个体系之前需要拿出需要更换的理由。也就是说当用一种体系怎么都不好分的时候才考虑去换另一种,否则没有根据的就随意去更换会感觉比较盲目,不系统。

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  • 东风恶

    第18楼2010/04/21

    楼主思路很清楚,DAD是安捷伦的。
    不错,学习了!

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  • chqiu111111

    第19楼2010/04/21

    首先,谢谢你对我提出建议。
    一、呵呵,不好意思啊,每个峰的出峰时间的确是有些出入。
    二、是啊,ph变化对我这个物质影响我觉得还是挺大的。在用ph3的时候,基本上产物峰都没有出来,或许是我的物质在ph3的时候析出了。我也不知道为什么。
    三、我换甲醇的理由就是:因为甲醇的洗脱能力没有乙腈强,我用乙腈的时候,乙腈的比例很小,那么差不多都是水了,所以我想换洗脱能力弱一点的甲醇,这样的话,流动相的水就不是很多。对柱子也会好一点。不过我看了一下,好像没有什么效果!
    再次对你表示感谢啊!!!

    zxhcnf(zxhcnf) 发表:首先非常感谢您和我们一起分享您的经验。谢谢!在这里我也要跟楼主提几个建议,一是,您的这个谱图和后面总结内容上标识的出峰时间好像不太一致,对了半天,我眼睛都花了也没整明白呵呵。。如果对映好了会更好。
    二.方法开发的时候不宜频繁的更换缓冲盐的体系,这样很多规律性的东西都不太好掌握,特别是pH的变化,有时候对保留时间会有很大的影响。
    三.甲醇和乙腈体系是有差别的,大致可以预测的是,乙腈的洗脱能力比甲醇强,至于它们的选择性哪一个更适合您的样品要看运气了,但至少从一个体系换至另一个体系之前需要拿出需要更换的理由。也就是说当用一种体系怎么都不好分的时候才考虑去换另一种,否则没有根据的就随意去更换会感觉比较盲目,不系统。

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  • chqiu111111

    第20楼2010/04/21

    对啊,的确是这样的,不过对于我的化学反应而言,本来预计也就是包括底物、产物、副产物三个峰,是不是我想要的东西得打谱之后才看得出来,我就需要知道底物的浓度降低,反应一段时间后有固定的产物生成趋势就可以了,呵呵!还有一个,就是我也想把保留时间调到10min以后,但是不敢调了,因为如果再调的话,就全部是水相的了,我的柱子不是水相柱,所以也不敢再试了,呵呵!请问你有什么建议可以把保留时间往后面移吗?

    zxhcnf(zxhcnf) 发表:从定量分析的角度,这么长的柱子出峰在5min之前的通常都不能算是真正的峰,因为这些峰出峰都太快了很容易引起杂质的干扰。但为了监测反应,目的是观察几个峰的相对大小,而且监测是即时进行的,需要很快出结果,否则峰还没出来反应也许已经结束,那就失去了监测的意义了。

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