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  • hebade

    第11楼2010/05/14

    这个我就不知道了。看高手解答。顺便学习一下。[/quote]

    偶经扫描看到芦丁在358nm呈现最大吸收峰,也没有在510nm处测定最大吸收峰。
    我认为,前者是直接法,一般加适量乙醇溶解芦丁,然后加蒸馏水定容,测之。
    而后者可能用的是络合—比色法,在芦丁溶液加入一定量的显色剂(如硝酸铝法-先加亚硝酸钠溶液,然后硝酸铝溶液,最后加上氢氧化钠溶液),然后测定。(我未做过,是看了多篇文献得出来的结论,苦于借点试剂都难,所以没做到,有心人可以做验证一下。)

    我在其中摘了一段下来


    更为详细请看附件文摘,请高手解答。

    lingshike(lingshike) 发表:在下愚昧,实验中未在510nm处测量得最大吸收峰,反而在360nm处得到,会不会是助色团的影响,造成吸收波长的偏移?

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  • 初学者&九点虎

    第12楼2010/05/14

    这个我就不知道了。看高手解答。顺便学习一下。[/quote]
    这个不会有这么大的偏移吧

    lingshike(lingshike) 发表:在下愚昧,实验中未在510nm处测量得最大吸收峰,反而在360nm处得到,会不会是助色团的影响,造成吸收波长的偏移?

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  • 初学者&九点虎

    第13楼2010/05/14

    是不是酸度没有控制好,你这种情况是否有重现性啊

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  • scz021

    第14楼2010/06/06

    不知道
    亚硝酸纳,和硝酸铝起的什么作用,

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  • wangg5211

    第15楼2011/03/23

    我全波长扫描的数值在327nm,不知道为什么

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  • shawn1280

    第17楼2011/08/15

    我做了一个扫描,差别很大,怎么办?最大吸收波长在400左右,跟510相差很远

    lingshike(lingshike) 发表:我觉得没有必要。
    总黄酮一般就是以芦丁做为对照品的。总黄酮的最大吸收波长就是芦丁的最大吸收波长吧。你自己测一个紫外扫描。可能就是510nm,当然也有可能偏差1-2nm,这个影响不大的。

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  • shawn1280

    第18楼2011/08/15

    我扫描之后,最大吸收波长在400左右,与510相差很远,怎么办?

    lingshike(lingshike) 发表:我觉得没有必要。
    总黄酮一般就是以芦丁做为对照品的。总黄酮的最大吸收波长就是芦丁的最大吸收波长吧。你自己测一个紫外扫描。可能就是510nm,当然也有可能偏差1-2nm,这个影响不大的。

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  • wyxyx

    第19楼2011/08/15

    用分光光度法测定提取物中总黄酮含量是目前普遍采用方法。一般采用硝酸铝-亚硝酸钠显色法,以芦丁为对照品,在一定波长下测定。其基本原理是:铝离子和具有3-羟基、4-羟基或5-羟基及邻二羟基结构的黄酮类化合物络合,并引起相应吸收带红移。
    不过我曾经测过芦丁对照品溶液经铝盐显色后,最大吸收波长并非为510nm,而是420nm,但由于在波长420nm前测得吸光度值不稳定,故选择吸收峰波长510nm为最佳定量测定波长。

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  • xilan1978

    第20楼2011/10/28

    我在紫外光扫描的时候,还在254nm处有一个吸收,也不知道是什么原因,有2个吸收峰

    (single2015) 发表: 在下愚昧,实验中未在510nm处测量得最大吸收峰,反而在360nm处得到,会不会是助色团的影响,造成吸收波长的偏移?

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  • 初学者&九点虎

    第21楼2011/10/30

    这个我就不知道了。看高手解答。顺便学习一下。[/quote]
    助色团的影响没那么大把,我觉得是否添加了显色剂,使得本应该在紫外区显色的,搞到了可见区

    lingshike(lingshike) 发表:在下愚昧,实验中未在510nm处测量得最大吸收峰,反而在360nm处得到,会不会是助色团的影响,造成吸收波长的偏移?

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