miss_fairy
第51楼2014/12/08
关于头孢类聚合物分析的咨询
看了你的帖子,感到很有帮助。由于最近单位要进行分子排阻法扩项,而我们从来没有接触过凝胶柱的使用,所以想请教几个问题:
1、试验使用平时走C18的液相色谱仪就可以吗?有没有什么区别和需要注意的呢?
2、 药典规定的进样量是100~200μL,而我们的自动进样器最大进样量只有99μL。我们采用99μL进样可以吗,会不会有什么问题?
3、 蓝色葡聚糖2000,有什么使用注意吗?配溶液时,与普通化学试剂有区别吗?进样前过滤膜时会不会被截留而有损失?需不需要回收再利用,还是用完就扔了?如果回收或丢弃需要什么特殊的处理吗?需要分段接收流出液吗,如果需要如何分段和查看时间,又如何处理?还有就是,它就是定位用的是吗,还有别的用处吗?
4、我们买了现成的填料是Sephadex G-10的凝胶柱,使用上有什么注意的?看过一点资料是关于自己填充柱子的,说凝胶用前需要浸泡活化,之后是回收重复利用的。那么现成的柱子有没有什么区别和需要注意的呢,还需要活化吗?还有就是由于买不到叠氮化钠,最后封存柱子怎么处理?由于怕长菌,流动相和封柱子的水需要处理吗?
5、药典里的对照品与供试品为什么在不同的流动相中走,对结果有什么影响?为什么流动相先走水(B)后走盐相(A),顺序反过来可以吗?
6、你的文章里涉及到的高分子杂质仪是做什么用的?
7、试验的柱温在多少比较合适?
8、你提到样品要现配,但由于试验时间可能比较长,我能不能把溶液提前配出来放到自动进样器里?放多久不会影响试验结果?需不需要做什么处理?
9、头孢类物质的对照品本身有聚合物的峰吗?标准说以头孢某某计,就是以聚合物的峰面积和该物质的称取量计算的是吧;各种指标如重复性和线性等都是测定聚合物的峰,我的理解对吧。
10、药典里,对照品溶液与供试品溶液的浓度相差很大,为什么?
问题有点多,而且可能很外行或愚蠢,望谅解,不要笑我。而且我可能想的不全,有的细节没注意到,如果有别的什么需要注意的地方也请告诉我。
请楼主和其他知道的朋友指教。谢谢。