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  • xue2009

    第172楼2010/07/29

    这个很容易，你参照峰拖尾和峰前延的原因看，很容易解决的。

    wkfei1128(wkfei1128) 发表:plexu您好！我有以下问题想请教：
    色谱柱的安装有什么技巧吗？只要保证不漏就行了吗？
    还有所谓的死体积怎么测定呢？

    测定多肽样品时，十几肽或者二十几肽时，有时峰前延的比较厉害，有时峰拖尾比较厉害，这是什么原因呢？是样品的问题还是柱子的问题？

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  • xue2009

    第173楼2010/07/29

    恩，我估计PH为2的时候硅胶已开始大量脱落了

    老多_小多(emoc98311) 发表:2接近极限了，肯定是相当的不好

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  • zqy0797

    第174楼2010/07/29

    plexu您好！我有以下问题想请教，
    请问：……

    柱子的平衡时间跟填料关系大吗？哪种最快，哪种最慢？因为我在做离子交换柱的时候平衡是相当的慢

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  • xue2009

    第175楼2010/07/29

    从小流量到大流量慢慢升的原因是使得柱压也是逐渐增大，不至于猛的增大，这样可以延长柱子的寿命。至于你说短肽总是冲出来，这说明在柱子的保留效果不好，你可以考滤调节PH值使之处于等电点下，这时的保留是最强的，还有就是考虑加离子对试剂进去也可以等等

    wkfei1128(wkfei1128) 发表:非常感谢plexu的回答，还有一点不明白，就是记得以前拿到C18柱，会用甲醇从小流量到大流量慢慢活化，这样做的目的是什么呢？是先用溶剂活化吗？然后再用样品？
    还有测定短肽总是冲出来，该怎么解决呢？就是和溶剂峰出在一起，或者出在溶剂峰之前。

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  • xue2009

    第176楼2010/07/29

    氨基柱不能用水冲，因为水相的比例越高氨基柱越有发生水解的可能，应当尽量减少水在氨基柱的停留时间。

    dongyuzhang520(dongyuzhang520) 发表:plexu您好！我有以下问题想请教，

    我们在用的氨基柱时，有时候峰型突然变宽，有拖尾，用一段时间就又好了，不明白是什么原因造成的，如果要再生氨基柱的时候应该怎么做呢？是像您先前回答的问题中提到的，用一定比例的氨水冲洗吗？

    氨基柱可以直接用纯水冲洗吗？记得当时买的氨基柱那个使用说明书上说不能用纯水冲？是这样的吗？如果可以冲的话，一般冲多久？

    谢谢！

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  • xue2009

    第178楼2010/07/29

    plexu您好！我有个问题：关于配置流动相，有机相我们可以甲醇乙腈同时用，这个是基于什么考虑的？是不是根据甲醇乙腈选择性不同、样品在这个两者的溶解度的差异以及调节洗流动相脱能力来考虑的？谢谢

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  • mdqxiaorui

    第179楼2010/07/29

    Plexu您好，我先问您一个关于岛津LC-2010的仪器故障问题，就是在仪器使用期间忽然停止运行，并且提示说在线真空脱气机出现故障，我想请问在这种情况下应该如何逐一的排除故障?
    谢谢！

    版主提示：讲座只提关于色谱柱的问题

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  • plexu

    第180楼2010/07/30

    pH2左右容易使键合在硅胶基质上的固定相水解流失，包括C18和封尾试剂的水解，封尾试剂相对更容易水解。不知道你保存的酸性环境是不是含有缓冲盐，如果不含缓冲盐，只是短期几天保存在酸性流动相中，也不必过份担心，最多相当于这几天一直在使用这根色谱柱，因此减少几天的使用寿命吧；有缓冲盐就麻烦一点，保存期间水分挥发可能会导致缓冲盐结晶在柱内析出，对柱子损伤很大。

    wkfei1128(wkfei1128) 发表:plexu您好！我有以下问题想请教：
    C18柱如果之前曾有些天一直保存在酸性环境中，会对柱子有什么损坏吗？ph在2左右。

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  • xue2009

    第181楼2010/07/30

    是键合在硅胶上的固定相水解吗？我认为是硅胶的脱落，是C18氯硅烷和硅胶反应的逆反应，那就应该是硅胶的脱落。

    plexu(plexu) 发表:pH2左右容易使键合在硅胶基质上的固定相水解流失，包括C18和封尾试剂的水解，封尾试剂相对更容易水解。不知道你保存的酸性环境是不是含有缓冲盐，如果不含缓冲盐，只是短期几天保存在酸性流动相中，也不必过份担心，最多相当于这几天一直在使用这根色谱柱，因此减少几天的使用寿命吧；有缓冲盐就麻烦一点，保存期间水分挥发可能会导致缓冲盐结晶在柱内析出，对柱子损伤很大。

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  • yongzhbenq

    第182楼2010/07/30

    pH=2还暂时不会让硅胶脱落，只是有可能会使键合相流失

    xue2009(xue2009) 发表:恩，我估计PH为2的时候硅胶已开始大量脱落了

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