我认为也是柱头塌陷了，你的样品对柱子损伤极大，要加上保护柱，还有每次做完样品要及时充分的冲洗柱子

应该是柱子塌陷了，PH太高，填料被溶解了

柱压有什么变化？用测试样品再测试下色谱柱
是什么品牌的色谱柱？换一家试试看会不会还有这样的现象

换一根其他品牌的柱子

我有遇到过类似的情况，前一天还峰型正常，第二天用同样的色谱条件就分峰了，将色谱柱倒用后峰型变得正常了，应该是柱头污染造成的。还有就是我以前用氨基柱做反相时，出现分峰，倒用仍无改善，分析原因，应该是填料的氨基脱落造成的。所以楼主不妨将柱子倒用试试。

感觉是进样器污染了。多清洗几次试试。新柱子不可能那么快就坏了吧。

唉 应该是柱子没有冲洗保存好，可怜的人哪！

我的也是这种情况 有没有做过氨基酸的 我的是里面有18种组分 同样的条件 其他的16种组分峰形都完全正常 只有两个组分出现双峰 这样是因为柱头的问题吗？请解答

我出遇到过这种情况，用二氯甲烷低流速反冲

连续换几根新柱子都是这样，估计是你的样品问题。你的流动相条件我也看了没什么问题，流动相PH值六点多的话不算高，10左右的我都用过。你用血清直接上液相可能有问题，里面含蛋白比较多，可能会堵塞、污染填料。建议你的样品前处理好好做一下，过一下SPE柱或者用其它除蛋白的方法。