茅茅
第12楼2010/08/24
三、过滤(离心)问题
此问题主要针对样品溶液供测试前最后一步的前处理,对照品溶液不需要这一步。一般样品溶液最后上色谱或光谱分析时都需要澄清溶液,而混有辅料的溶液是混浊的。处理方式一般是过滤或者离心。
1 过滤
滤器:滤纸(一般是中速,定量滤纸)或一次性针头滤器(0.45μm)。
滤液:一般取续滤液来测定。为什么?因为初滤液有滤器吸附等干扰因素影响,出来的溶液浓度并不是真实浓度。药典专业术语:“弃去初滤液,取续滤液测定。”那么,弃去多少呢?视滤器大小决定吧!一般是2-10mL。
2 离心
离心的作用是为了得到上清液,大多时候可以视为与过滤等效的前处理,但是某些辅料不容易沉淀下来,效果就不理想。需要做方法验证后再用。
茅茅
第13楼2010/08/24
四、 配制标准系列溶液问题
在方法验证的时候需要配制系列标准溶液,确定标准曲线的浓度范围。
1 取样器具
假如取储备液1.0,2.0, 3.0,4.0, 5.0mL, 需要怎样的取样器具呢?
胖肚吸管?直形吸管? 移液枪?
首先排除的是移液枪。因为移液枪一般用于10-1000μL的取样。
理论上说来单标线的胖肚吸管更准确。我们甚至去订做了3mL的胖肚吸管。假如取4mL,就用2mL的胖肚吸管取两次。但是缺点是使用的移液管多,费时且不方便。
多标线的直形吸管使取样变得简单且只需一支吸管就可以做到。注意操作的时候从上端零标线往下放。我个人觉得用这种方法配制标准溶液是最理想的,当然,需要的移液管必须是正规厂家生产的经分段检定合格的A级移液管。
2 浓度范围
在实验前先根据标准拟定一个浓度范围,实验结果出来后随时调整浓度范围,调整范围应该遵循如下规则:
1)使供试液的浓度落在曲线范围内
2)浓度最低点接近定量限,也就是10倍的信噪比浓度,可以是定量限的2-3倍,视具体情况而定。
3)浓度最高点也是视具体情况定的,以最低浓度的10倍到100倍最为常见。
zwyu
第16楼2010/08/28
很好的经验之谈。
另外,麻烦茅茅把后续的补充内容放到主贴里去,现在帖子字数无限制的,以方便大家阅读。
神话
第19楼2010/08/31
胖肚吸管(移液管)对于单次移取是很准确的,
多标线的直形吸管(吸量管)对于移取标准系列是准确的。
移液管通常与容量瓶配合使用,因此经常做两者的相对体积校准。