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  • farmkid

    第32楼2010/09/25

    我觉得很奇怪,两个串联的质量分析器,如果做单扫描,从来没有听说要把另外一个质量分析器移除的道理。单纯的Q,
    如果只有RF,就类似QJET或者s-Lens,有聚焦的效果;如果只有DC,就类似碰撞池的加速电压;这些都不会有m/z限制

    的作用。QQ-TOF,不给前面两个Q加上电压,也不会影响TOF全扫描,这是常识问题。如果做“全扫描要把四级杆拿出来”,

    似乎是在笑话AB公司,或者想笑话所有的Q-TOF类及其他
    串联质谱(包括IT-TOF,LTQ-orbi)厂商。

    frappuccino(frappuccino) 发表:Q6-2.TripleTOF 5600仪器做出来的蛋白能够是完整蛋白吗? 也就是说前级四级杆对大分子量的蛋白是否会发生截留的作用,影响分析。
    ABS:在采用TOF检测时,前级四级杆不进行选择离子,只作为传输通路,对数万分子量的蛋白基本没有截留作用。

    对该问题存在质疑:

    贵公司的仪器在采用TOF检测模式的时候,是否可以这样理解,在前四级杆不对离子进行阻拦,全部进入TOF检测。

    这里存在的问题是,你还是通过了四级杆,因为四级杆结构的限制(其质量范围窄),在保正传输率的前提下,四级杆必定会影响部分分子质量段的离子进入TOF。而非大家字面上认为的离子全部进入了TOF。
    除非你在TOF模式,把四级杆从离子经过的通道中取出来。贵公司是在使用这种技术吗?

    使用esi电离源测定蛋白时,蛋白的多电荷必将产生广泛范围的M/Z信号(大于20000),已经远远超出了四级杆的5000的范围.
    不知怎样的技术解决了Q-TOF此类的结构问题呢?

    AB SCIEX 公司市场部调研经理彭立新先生
    你看能给在解答一下吗?

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  • 职业游民

    第33楼2010/09/26

    祝贺圆满结束,虽然没有时间去参加,但是依然很高兴

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  • frappuccino

    第34楼2010/10/08

    您好用户,您一看就是串联四级杆的高手,计算的很正确。但是你算的是串联四级杆的方式。在TOF部分不是这样计算的啊。
    因为没有用过AB的TripleTOF 5600,猜测其实通过提高tof的检测器电路提高的灵敏度。可以说是现在市面上最好的仪器了。但是总体技术没有变化。

    个人意见,仅供参考。

    farmkid(farmkid) 发表:这个话题有点意思。天天在实验室混,免不了各种定性定量头疼的问题。5600没有用过,还不好说。关于synapt,实际

    应用中似乎跟frappuccino所说的有一点距离。
    synapt最大20spec/s,关联扫描10spec/s。考虑到谱图质量的问题,也许5spec/s比较合适,也就是说一个MS/MS花费

    的有效时间大概是200ms,如果是全扫描的话,大概400ms甚至更多会好一点。同时定性定量分析一个化合物,一个全扫

    描带2个MS/MS定性扫描(高,低两种能量碰撞),也就是说一个
    duty cycle花费的时间是800ms。假定用UPLC,峰宽是

    3ms,在800ms的duty cycle情况下,这个峰4个采样点。我想问一下,4个点峰形的定量效果怎么样?如果有两个化合物同时出峰呢?试

    想一下,在10分钟内同时定性定量分析100个化合物(这个要求不算太高吧),每个化合物的提取色谱峰峰形保证在16

    个采样点以上,用synapt该怎么做?

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  • xueliwu2000

    第35楼2010/10/09

    31楼的一看就是没用过Q-TOF的,哈哈,连基本概念都没搞清楚咧,要多学学哟

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  • gosome

    第36楼2010/10/10

    QTOF(或者是TOF)的同时定性定量
    应该是做高分辨的一级全扫描
    然后用提取的XIC图来对每个化合物定量
    一般精确的分子量和一级图谱就可以定性(要求高的话就加个二级子离子扫描)
    假设ls某楼的UPLC峰真的是3s,要求有16个采集点
    则TOF全扫描采集频率要在5Hz或以上
    这对于一般TOF来说(很多指标都到20Hz的)是一个比较合适的速度
    得到的图谱质量也能有保证

    而串联四极杆一般要MRM加上一两个二级全扫(扫描方式要改变)
    本身MRM采集速度很快,一秒都是几百个离子对的
    所以多组分(甚至共流出)的定量问题都能够轻松解决
    定性问题则通过二级全扫来进行确证

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  • farmkid

    第37楼2010/10/15

    感谢几位的提醒。
    这里需要做一个简单的说明:
    1、如果用于食品安全检测,按照欧盟提出的鉴定IP分值原则,高分辨MS/MS的分值是最高的。
    2、如果是做小分子鉴定或代谢组学研究,Scipps研究所的METBLIN公开数据库也在努力提供高分辨MS/MS搜索。
    3、如果是做蛋白组学研究,没有MS/MS鉴定是很难想象的。

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