乐果
第11楼2010/09/20
16 荧光检测器性能的检定
16.1 波长示值误差的检定
固定波长荧光检测器有两块滤光片,可取下在标准分光光度计上检定。可调波长荧光检测器可参照第15.2款的方法进行(若仪器使用正常,此项可以不检)。
16.2 基线漂移和基线噪声的检定
将检测器与记录仪联接好,仪器预热稳定后,用注射器分别将丙酮和水(5 mL左右)注入流动池中(出口处接一小烧杯),重复几次,将池冲洗干净后,再注入5 mL丙酮,堵住出口,5分钟后注入5 mL 0.05 mol/L 的H2SO4水溶液(注意不要有气泡),将灵敏度选择开关置于最灵敏档,记录基线30分钟,由此计算基线噪声和基线漂移(记录纸速为10 mm/min)。
16.3 灵敏度和最小检测浓度的检定
将检测器与记录仪联接好,灵敏度选择最灵敏档,激发波长为345 nm,发射波长455 nm(固定波长型仪器不设置波长)用注射器慢慢向流动池中注入3 mL左右0.05 mol/L 的H2SO4水溶液,接通电源,几分钟后记录笔有反应,调节凋零旋钮,使记录笔处于记录纸零点处,然后用注射器将10-8g/mL的硫酸奎宁的0.05 mol/L的硫酸水溶液注入流动池记录笔应处于满量程的70%以上的以置,由此计算检测器灵敏度,再按cl = 2·HN·c/H式计算最小检测浓度(各符号的意义与式(5)同)。
16.4 线性范围的检定
采用第16.3款的实验条件,范围选择置于中间位置,用注射器向流动池中注入0.05 mol/L 的H2SO4水溶液,将池冲洗干净。然后依次向池中注入1×10-5,2×10-5,3×10-5…1×10-4g/mL的硫酸奎宁的H2SO4水溶液,同时记下记录仪读数,重复3次取算术平均值,以硫酸奎宁浓度与记录仪读数作图,求出曲线拐点(读数较理论值低5%处)。此点为线性上限ch。由第16.3款得cl值,ch/cl比值为线性范围。
16.5 范围选择器换档误差的检定
操作、计算方法于第15.6款相同。
17 差示折光检测器性能检定
17.1 基线漂移和基线噪声的检定
将检测器及仪器与其它部分联接好,接通电源预热后,以纯水为流动相,流量为1 mL/min,参比池充纯水,范围选择在最小档,待仪器稳定后记录基线30分钟,计算出基线漂移和基线噪声(实验中应特别注意室温的波动)。
17.2 灵敏度和最小检测浓度的检定
将检测器与色谱柱拆开,用蒸馏水冲洗样品池多次后,再用3次水冲洗,范围选择最灵敏档,记录仪输入电压与检测器输出电压相同,记录笔调至零位。用注射器将10-4g/mL丙三醇水溶液注入样品池,记录笔应处于满量程的70%以上的位置。重复3次,取算术平均值由此计算检测器的灵敏度。根据第17.1款测得的基线噪声及式(5)计算最小检测浓度。
17.3 线性范围的检定
将样品池于参比池用3次水反复冲洗后,依次向池中注10-6,10-5,10-4,10-3,2×10-3,3×10-3,4×10-3,5×10-3g/mL丙三醇水溶液,同时记下记录仪读数。以丙三醇浓度与记录仪读数作图,求出曲线拐点(读数较理论值低5%处)。此点为线性上限ch。由第17.2款得cl值,ch/cl比值为线性范围。
17.4 范围选择器换档误差的检定
操作、计算方法与第15.6款相同。
说明:检定中使用的色谱柱均为ODS-反相柱