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  • katherine7

    第11楼2010/12/24

    非常感谢，

    jcok123(jcok123) 发表:给你介绍一篇我们课题组发表的文献吧，应该对你有帮助

    Tetrabutylammonium phosphate-assisted separation of multiplex PCR products
    in non-gel sieving capillary electrophoresis

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  • katherine7

    第12楼2010/12/24

    非常感谢

    jcok123(jcok123) 发表:给你介绍一篇我们课题组发表的文献吧，应该对你有帮助

    Tetrabutylammonium phosphate-assisted separation of multiplex PCR products
    in non-gel sieving capillary electrophoresis

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  • katherine7

    第13楼2010/12/24

    首先，谢谢你的回复，你的信息对我很有帮助。
    凝胶这个问题，已经考虑到了，但是看文献中好像提到，凝胶分离不如无胶筛分好， 可是究竟如何来操作，还没闹明白！

    heguang(heguang) 发表:你的缓冲体系里面为什么没有看到凝胶？Tris-硼砂的体系用来分离dsDNA是没有错，但是你一定要加凝胶进去的，没有凝胶，你怎么把不同长短的DNA分开呢？同时你还要考虑DNA在毛细管内壁吸附的问题，如果你用裸管做，你就要用有动态吸附性质的凝胶，PVP效果不错；如果你用的没有动态涂层作用的凝胶，你就必须要用涂层毛细管做。毛细管长短不是关键，一般分DNA的毛细管40-50cm足够，75um也没有问题（LIF检测），如果紫外检测就用100um。

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  • katherine7

    第14楼2010/12/26

    是否意味着，若配置硼酸缓冲体系，就用硼酸来调节pH值？

    poplar_yang(poplar_yang) 发表:pH值需要计算; 可设置楼梯; 硼酸可以pH4-12, NaH2PO4可以pH1-9等等

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  • katherine7

    第15楼2010/12/26

    动态吸附性质，具体怎么理解，我文献阅读时，就没弄明白。

    heguang(heguang) 发表:你的缓冲体系里面为什么没有看到凝胶？Tris-硼砂的体系用来分离dsDNA是没有错，但是你一定要加凝胶进去的，没有凝胶，你怎么把不同长短的DNA分开呢？同时你还要考虑DNA在毛细管内壁吸附的问题，如果你用裸管做，你就要用有动态吸附性质的凝胶，PVP效果不错；如果你用的没有动态涂层作用的凝胶，你就必须要用涂层毛细管做。毛细管长短不是关键，一般分DNA的毛细管40-50cm足够，75um也没有问题（LIF检测），如果紫外检测就用100um。

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