固定人员操作。聚酰胺和柱层析样品一定要洗脱彻底。这里损失和差异较大

和另一位同事交流一下，比较一下两个人那里操作不同。

不同的人做出来不一样,是可能的,测试是讲经验技术的.

保健食品中总黄酮的测定方法（保健食品技术规范2003版）如下
1试剂
1.1聚酰胺粉。
1.2芦丁标准溶液：称取5.0g芦丁，加甲醇溶解并定容至100mL，即得50ug/ml。
1.3乙醇：分析纯。
1.4甲醇：分析纯。
2 分析步骤 ,
2.1 试样处理：称取一定量的试样，加乙醇定容至25ml，摇匀后，超声提取20min，放置，吸取上清液1.0ml，于蒸发皿中，加1g聚酰胺粉吸附，于水浴上挥去乙醇，然后转放层析柱，先用20ml苯洗，苯液弃去，然后用甲醇洗脱黄酮，定容至25ml，此液于波长360nm测定吸收值，同时以芦丁为标准品，测定标准曲线，求回归方程，计算试样中总黄酮的含量。
2.2 芦丁标准曲线
吸取芦丁标准溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml于10ml比色管中，加甲醇至刻度，摇匀，于波长360nm比色，求回归方程，计算试样中总黄酮的含量。
3计算
公式略

谢谢前面各位的宝贵意见
该方法我已经帖出来，请各位高手看看
我们把不同的人做的过程进行了比较，发现聚酰胺用的不同，现在我怀疑是聚酰胺种类的问题，造成结果不同，但是，两种聚酰胺做出来的结果都不行，请教各位，聚酰胺种类对结果影响是否如此大，或者有其他的控制点我们没有发现？现在我还没有考虑到方法的重复性好与坏，目前考虑的是方法是否可行，操作的哪个点对结果影响较大，因为回收做了，结果也不好

那同一个人重复的结果怎么样呢？

个人感觉还是在上住和洗脱那，上住是否完全？洗脱是否干净，一定要控制流速

应该是前处理的手法或是同一手法处理的时间长短不一样吧

你的层析柱是怎么装的，装了多少？如果装的太多，还按上面的溶剂量来洗的话有可能洗不彻底的，

结果相差很大，说明你的方法有问题