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  • 有水有渝

    第11楼2011/03/05

    应助达人

    一般会，但有时很难找到物质的PKa，所以通过配制一系列不同PH的流动相来选择。

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  • 省部重点实验室

    第12楼2011/03/05

    流动相的pH值
    　　采用反相色谱法分离弱酸(3≤pKa≤7)或弱碱(7≤pKa≤8)样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸的pKa值时，弱酸主要以分子形式存在;对弱碱，情况相反。分析弱酸样品时，通常在流动相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液;分析弱碱样品时，通常在流动相中加入少量弱碱，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和30mmol/L三乙胺溶液。
    　　注：流动相中加入有机胺可以减弱碱性溶质与残余硅醇基的强相互作用，减轻或消除峰拖尾现象。所以在这种情况下有机胺(如三乙胺)又称为减尾剂或除尾剂。

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  • 儒雅凤

    第13楼2011/03/05

    有启发。
    看来，流动相的PH值对分离效果的影响不容小视。

    省部重点实验室(gl19860312) 发表:如何选择缓冲液PH值？
    　　在选择缓冲液PH值之前，应先了解被分析物的Pka，高于或低于Pka两个PH值单位的，有助于获得好的、尖锐的峰，从HH公式：PH=Pka+log([A-]/[A])得知，溶液 PH值高于或低于Pka两个单位，化合物中99%以一种形式存在，而一种形式存在的化合物才能获得好的尖锐的峰。
    　　如果选择不到合适的，样品的pKa与流动相的pH非常接近，那么流动相pH微小的变化，都会引起样品保留时间较大的变动。

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  • abcdefghijkl123

    第14楼2011/03/07

    我们一般也不会，一般我们都是按标准进行的

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  • sjbsjbsjb

    第15楼2011/03/07

    如果是 弱碱(7≤pKa≤8)样品时，加碱PH不是超过了8吗，那柱子就受不了，怎么办呢

    省部重点实验室(gl19860312) 发表:流动相的pH值
    　　采用反相色谱法分离弱酸(3≤pKa≤7)或弱碱(7≤pKa≤8)样品时，通过调节流动相的pH值，以抑制样品组分的解离，增加组分在固定相上的保留，并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸，流动相的pH值越小，组分的k值越大，当pH值远远小于弱酸的pKa值时，弱酸主要以分子形式存在;对弱碱，情况相反。分析弱酸样品时，通常在流动相中加入少量弱酸，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和1%醋酸溶液;分析弱碱样品时，通常在流动相中加入少量弱碱，常用50mmol/L磷酸盐缓冲液和30mmol/L三乙胺溶液。
    　　注：流动相中加入有机胺可以减弱碱性溶质与残余硅醇基的强相互作用，减轻或消除峰拖尾现象。所以在这种情况下有机胺(如三乙胺)又称为减尾剂或除尾剂。

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  • xmqhp

    第16楼2011/03/08

    没有参考文献的话可能会考虑，也可以先配置成溶液，测PH

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  • 儒雅凤

    第18楼2011/03/13

    pH值可以改变目标物/吸附剂的离子化或质子化程度。对于强阳/阴离子交换柱来讲，因为吸附剂本身是完全离子化的状态，目标物必须完全离子化才可以保证其被吸附剂完全吸附保留。而目标物的离子化程度则与pH值有关。如对于弱碱性化合物来讲，其pH值必须小于其pKa值两个单位才可以保证目标物完全离子化，而对于弱酸性化合物，其pH值必须大于其pKa值两个单位才能保证其完全离子化。对于弱阴/阳离子交换柱来讲，必须要保证吸附剂完全离子化才保证目标物的完全吸附，而溶液的pH值必须满足一定的条件才能保证其完全离子化。

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  • lanpishu23

    第19楼2011/03/13

    加碱很伤柱子，除非用哪种封尾的柱子

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  • nixiaolong

    第20楼2011/03/14

    学习了 我们一般就按照标准上配

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  • dhj1975

    第21楼2014/03/26

    真是专家级的讲解

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