勤诚盛达
第13楼2012/02/10
为什么用离心浓缩?
对于 生物样本 脆弱样本 采用电泳,GC,HPLC 等方法分析和处理的样本
都很适于采用离心浓缩
离心浓缩的目的
浓缩样本,同时还避免以下问题:
交叉污染
样本丢失
样本变性
样本活性下降
氧化
同时兼备以下优点:
高的回收率
对环境无害
操作简单
与离心技术的区别
离心分离 将悬浮的固体从液体中分离出来
离心浓缩 溶液
偶尔, 样品会完全干燥
在这种情况下, 样品必须是无机物,或者在干燥后马上被取走
离心浓缩技术
抽真空,降低气压,从而降低溶剂的沸点,使溶剂能在低温下蒸发
给腔体施加热量 (能量) ,从而提高蒸发速率-
样本温度不会升高 !
样本在适宜的离心转速下离心,产生少量的“g”离心力
这样就防止了由于“暴沸”而产生的样本损失,或者由加热和离心浓缩很容易引起的离心管内布满泡沫现象
原理 – 真空效益
在既定的气压下,溶剂的沸点bp是固定的.
对不同的溶剂施加不同的能量
have 但对样品温度不会产生任何影响
因为样品的特定的气压下沸点是一定的,
只要蒸发还在进行,样品的温度就没有变化
原理 – 真空效益
降低溶剂的气压
(提高真空度)
这是一个关键因素!.
液体的沸点在真空状态下会降低.
真空同时还能…
将未浓缩的气体从腔体中吸走,从而减少蒸汽流向冷阱时的遇到干扰和阻力.
通过快速蒸发溶剂,可保持样品的低温状态
原理 – 能量需求
能量(热量)的输入,可补充蒸发过程所需要的能量,对于加快蒸发速度是非常重要的
能量必须是间接施加给样品,否则,样品必然会被局部加热,从而导致损害样品.
真空状态下对流是不可能发生的,因此采用辐射加热
腔体温度能高达 80°C
,而样品的温度却能保持在起沸点下 (或许是 5°C) ,直到样品完全干燥了温度才会上升
如果样品在真空状态下沸点很低,在不给样品施加能量的情况下让样品如果持续蒸发,样品很可能会结冰… 浓缩也就不可能了!
原理 –‘g’ 离心力效应
当溶剂蒸发 (沸腾), 会形成气泡 =>
溶剂往往会“暴沸”或起泡,会有小液飞溅到管外.
让样品在离心浓缩仪里旋转,产生足够的‘g’ 离心力,就能让样品停留在离心管内.
无样品损失.
无交叉污染.
样品被浓缩了或干燥后附着在管底
对于定量回收是最理想的
在角转头里,液体的表面积提高了,因此加快了样品蒸发和浓缩的速率
原理 – 样品的安全性!
非常重要 !
热敏感样品是不允许被完全干燥的.
在相变过程中能量的吸收引起的低温效应消失了,也就无法给样品提供保护.
真空压力计就可以用于判断是否浓缩的临界点
开始运行以后,马上观察最大真空度 [最小气压]
蒸汽的产生会导致气压的上升
随着溶剂的持续蒸发和减少,产生的蒸汽也会越来越少,气压也会下降.
在达到最小气压以前停止运行.
样品仍然是湿的.
结论
如果离心样品
在一个适宜的离心速度 / ’g’ 离心力
在真空状态下
通过辐射给样品补充能量
样品将在非常安全的状态下被浓缩
离心浓缩系统
完整的系统应包含以下部件
最简单的配置 :
浓缩仪,转头, 连接管线, 真空泵
离心浓缩系统
完整的系统应包括
在完善的配制 :
浓缩仪, 转头,隔膜泵,或高真空油泵以及油过滤器,连接管线, 冷阱,烧瓶,化学阱和吸收柱, 真空控制阀,真空压力计,手推车
浓缩仪的功能
离心
真空控制
在应用真空以前必须先以足够的rpm离心
能量
resistance heating of bowl (all models)
盖子上的辐射加热灯
加热盖
腔体上的加热灯
计时
run timer 控制整个运行时间
heat timer 控制加热时间,防止样品过热,保护样品
浓缩仪的设计 – 冷阱
冷阱
SpeedVac 冷阱温度范围: -5°C (药物开发), -50°C, -104°C
温度最低的型号长用于挥发性极强的溶剂.
溶剂在冷阱内的玻璃瓶里冷凝.
带快速连接口的玻璃瓶,很容易更换,也能作为溶剂的收集瓶.
热传导液 – Cryocool®硅树脂 液体
(如果经费紧张,乙醇也可以用 – 但如果用乙醇,请务必每个月更换乙醇,防止玻璃瓶破裂,因为冷凝水太多时会结冰)
浓缩仪的设计 – 化学吸收阱
化学吸收阱
吸收未被冷阱捕获的蒸汽,从而保护了真空泵.
SpeedVac System
一种尺寸, 吸收柱,用于水 +酸或放射性物质 & 有机物
浓缩仪设计 – 真空泵
真空泵
Thermo 能提供两种类型的真空泵.
Membrane (横隔膜), pumps.-无油泵
2 stage High vacuumoil pumps.2-级高真空旋转叶片油泵
无油泵非常抗强酸和有机溶剂.
无油泵不用维护 (不需换油).
通常情况下都选择无油泵.
在一些特定应用领域,需要用到高真空泵
Oil free (dry) pumps无油泵
其它浓缩方法比较
离心浓缩干燥的优点
1)干燥时间快,常规样品(24X1.5 ML)4小时左右。
2)可干燥样品容量规格多样1.5ml—250ml。
3)可处理所有液相样品,特别是强腐蚀性样品。
4)可在多种温度下处理样品,保证生物活性,及加速干燥时间。
5)混合物样品可分别回收,以便进一步利用,或方便处理
离心浓缩干燥缺点
1)无法处理固相样品
2)样品无法彻底干燥
3)最大单个样品体积较小(250ML)
4)单次最大可处理样品体积小(2L)
其他常用干燥方式
1)冷冻干燥机
2)旋转蒸发仪
3)氮吹仪
冷冻干燥优点
1)样品彻底干燥
2)一次可处理样品体积大
3)可处理特殊样品:血液,组织,泥浆,
纸张,骨骼等
冷冻干燥缺点
1)处理液相样品需预处理,操作复杂。
2)干燥时间长,常规样品大于10小时
3)处理各种规格样品需更换配件价格高
4)不可处理腐蚀性及放射性样品
5)处理样品温度单一,无法保证生物活性
旋转蒸发优点
1)干燥速度快
2)一次可处理单个样品体积较大
3)价格便宜
旋转蒸发缺点
1)加热方式无法保证生物活性
2)无法处理高挥发性,强腐蚀性样品
3)混合物溶剂无法实现分别回收
4)处理样品规格单一
5)无法处理微量样品(酶标板,1.5ML管等)
氮吹仪缺点
1)处理样品时间长,常规样品大于12小时
2)处理样品温度单一(样品温度低于沸点2C)
3)绝对无法处理腐蚀性或任何对人体有害或污染环境的样品(汽化溶剂直接进入周围环境)
4)干燥不彻底
5)样品溶剂无法回收,功能单一
6)处理样品量大或太少时,大量消耗氮气,成本上升
7)处理样品规格受限制,只能处理1-50ML 试管样品
8)针头易腐蚀
9)易产生样品交叉污染
氮吹仪优点
1)操作方便
2)价格便宜
以上资料由勤诚盛达提供
我公司多年来一直专业生产浓缩仪,质优价廉。
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湖南赫西
第16楼2018/09/11
真空离心浓缩仪与传统氮吹仪,旋转蒸发器比较
旋转蒸发器
以前,主要是采用旋转蒸发仪进行浓缩,但是,采用旋转蒸发仪进行浓缩缺点明显:浓缩速度慢,操作麻烦,尤其不适合小量样品。
氮吹仪
曾经是廉价的样品浓缩方式,现在因为其对环境污染的致命弱点,已经逐步被市场淘汰。从试管内被氮气吹扫而挥发出来的有机溶剂不经任何处理,直接散发到周围环境中,这些溶剂常常是强酸、强碱以及强腐蚀性物质。直接操作的实验人员极易因此出现健康问题,而这些溶剂挥发到空气里,也会对周围环境造成危害,包括办公室工作人员,周围绿化等。
真空离心浓缩仪
综合利用离心力、加热和外接真空泵提供的真空作用来进行溶剂蒸发,可同时处理多个样品而不会导致交叉污染。冷阱能有效捕捉大部分对真空泵有损害的溶剂蒸气,对高真空油泵提供有效的保护。真空泵使系统处于真空状态,降低溶剂的沸点,加快溶剂的蒸发速率。
真空离心浓缩仪推荐:赫西仪器。