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  • phyto

    第21楼2011/04/26

    见过的色谱柱,制备的一般比较大号,内径粗

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  • xizhi

    第22楼2011/04/26

    从事制备色谱纯化生物多肽两年有余,可以算是对此有所了解吧,相比于分析的液相制备液相并没有多大的区别。
    论起仪器的精密度,一般来说制备的其实还不及分析的,或者说制备液相对精密度的要求比分析低一些(为此国产的制备液相可以看到很多,但国产的分析液相不仅少,愿意用的更少),这种精密度主要体现在泵与检测器的稳定性的差异,当然一般柱子也是分析的更好,并且制备柱的压力上限(一般14MP)是低于分析的普遍上限(25MP),制备柱粒径大填料一般也很难做到结实,高压会造成空隙,换句话说更高的压力也要对泵有更高要求;
    有一点的区别算是比较明显的就是制备上样后一般要用起始梯度平衡几分钟,否则样品还没来得及在柱子里分布好就直接会被流动相冲出来,这样达不到分离的效果,而分析的是进样后直接走梯度的;
    样品溶解时的要求也是有差异的,分析时对样品中的有机相与水相的比例一般不是很高,只要样品溶解好,并且比例不是太离谱出峰都会很稳定的(与样品正常出峰时流动性比例作比较),而制备的对溶样体系要求很严格,就拿反向系统来说,有机相偏高出峰会很早,影响分离,有机相太低,虽然看上去能溶掉,可能一进液相系统就析出来,或者峰行会拖尾,至于如何调整比例要因产品及流动相而异。
    目前运用的领域还主要是生物医药化学方面,产品分子量一般在万级以下的,当前运用的有化药、多肽、小分子蛋白、核酸引物链等

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