首先，你的预备柱有问题；其次，如果开发的分析方法没有问题的话，你的色谱柱也有问题。

两个色谱图都存在问题：a是拖尾以及分离度降低，并且柱效也降低；b图是双头。通常建议a图用大浓度的流动相进行色谱柱再生，而b图应该将色谱柱的塌陷或者污染消除后再试试。

打开柱头看看吧，可能是柱头塌陷了。

不知道楼主样品进样浓度是多少，如果可以的话，如果再稀释一下，应该效果还可以。

预柱的可能性比较大