xizhi
第33楼2012/07/20
210nm左右的波长是没有问题的。
想知道你所说的不出峰,是一点峰都没,还是出现大包或者拖得很宽,而峰高极低,如果是这种情况你注意一下样品溶解后状态有没有点显粘稠,这就是样品没有完全溶解的结果,这样出的峰自然不明显。这种肽溶解时切记要先加乙腈再加少量水,尽量控制比例大于1.5:1(乙腈:水)。此外注意这条肽显出的酸碱性,高疏水性又显酸性的话就不要用TFA盐了,改用4G/L的醋酸铵盐,A、B相都是如此。
不知道你的样品其它杂质峰不能正常显示,如果都一点峰没有至少说明样品很可能没进到系统里,这个就要检查进样线路;样品如果进了系统而不出峰,除了前所说的原因,还有就是用高比例的有机相直接洗脱,如果能洗脱出来比较尖的峰,说明有机相比例还可以再提高;如果洗出来也看不到明显的色谱峰,建议改用CN柱试试。