进完一针分析完成后，要用纯有机相冲洗色谱柱几分钟，把上一次进样中的样品残留冲出色谱柱，这样才不会有引起色谱峰变形，因为残解留样品大多在色谱柱足以改变色谱柱的性质。曾经遇到司一客户在分析样品时，用10%乙腈水溶液做流动相，刚时候压力正常，做了十个样品后压力升了一倍，保留时间最后延迟了一分钟，她就是做完一个样品没有用纯有机相冲洗色谱柱才会有这种情况的。因为所用流动相中有机溶剂占的比例不高时，进完一针后没有用纯有机相冲洗色谱柱，经常会出现这类情况。

酸性太强了，对色谱柱的伤害太大。

梯度洗脱后，柱子没有平衡好，建议两次进样之间时间间隔放宽，使柱子充分平衡

确定一下是进样引起的还是流动相的影响，比如先不进样，平衡一段时间后进样，是否第一针就不行。