液相啦~

液相的内容先别着急，气相还没讲完。



　 GC-9A使用的是填充柱，虽然填充柱现在用得少，但是有些经验还是值得记录。对于上个世纪的色谱工作者来说，不仅要会用填充柱，还要会装填充柱。GC-9A以至于现在还在用的GC－14C，使用的填充柱都是我们自己装的。

　　下面介绍一下如何装填充柱（主要指玻璃填充柱）。

第一步，配制填料。

　　一般我们之所以不愿意直接购买商品填充柱，主要目的不是为了省钱，而是担心填料配得不好，只有自己做给自己用的，才会尽心尽力。毕竟，填料本身的质量才是色谱柱最重要的因素。

　　通常在国标或参考书上能找到填料的成分以及柱子的长度这两个数据。除了做甲醇的GDX系列外，我们常用的色谱柱都是气液型即固定液加担体类型，需要按要求购买配制。有一年我清理实验室，居然找出来几十瓶大大小小，五花八门的固定液和担体。从标签上看，有些固定液比我的年纪都大。

　　找齐固定液和担体后，下一步要做的工作是计算大概的填料量。我们以2米长，3.2mm内径的填充柱举例，我们需要填充的体积应该是3.14*0.16*0.16*200＝16mL，由于两端管均要留空，所以装填体积只会少不会多。

　　我们在配制填料时，一般不会配得太少，习惯于一次性配好三四根的量，反正成品也耐放，放个十几年都没问题，万一断了一根就能马上填。如果按三根柱子的量，就是50mL左右。取一只预先称重的100mL刻度小烧杯，往里面倒担体至50mL，多一点也无所谓，不用太严格，但是要称重。只有得到担体的准确重量，才能知道我们应该称取多少固定液。

　　称好固定液后，用有机溶剂在大烧杯里溶解，再倒入担体，充分搅拌均匀，在通风柜中自然挥干后，即得到我们需要的填料。这里要注意几点。

（1）不同的固定液溶解性相差甚大，有些溶解性很好，有些比较难溶（如FFAP），有些更类似橡胶极其难溶（如SE－30），在正己烷中泡好久才略微软化，过几天才觉得应该溶解完全了吧。所以这一步骤一定要有耐心。

（2)　搅拌时多使用玻棒，但是此时最好悬空搅拌，不要让玻棒与烧杯壁有所接触，导致碰碎担体。

（3）在挥干阶段，可以不时轻轻地悬空搅一搅，有助于溶剂挥干。

还是老货好啊

惭愧啊，一直用玻璃填充柱，没有一根是自己填的。我接手gc-14c的时候有很多已经充填好的柱子，空柱子一根都没有，也没有自己去试着装一根。

祝各位色友新年快乐！！　工作生活双丰收！！

<继续写记录>

　制备好填料后，装在试剂瓶中贮藏，条件好的可以放在干燥器中，但是放在外面的好象也不太受环境影响。接下来就是要准备好方法规定长度的空柱，这时要注意，填充柱不象毛细管柱，不同气相色谱仪厂家的填充柱是不通用的，甚至有些厂家自己不同型号的气相的柱子也不通用。空填充柱只能购买，自己很难加工。买国产的或买进口的皆可，柱子到货后要自己清洗干净再烘干，以去除腔体内可能残留的灰尘。

　　我以前的一个小经验：如果遇到好用的国产空柱，不妨多买几根储备起来，这些都是非批量生产。这次满意下次再买就不一定是一批质量了，更夸张的是可能厂家都不生产了，毕竟市场太专业太局限了。

　　买来空柱后还要注意一点细节，GC－9A的双U型柱子是有方向性的（有些圆形柱则没有方向性），方向性体现在柱两端是一长一短的，长的一端接检测器，短的一端接进样口。在使用色谱柱时，进样口的那一端还要加装个衬管，所以装好衬管后柱子在仪器中两边的高度又相对平衡了。

　　在制备填料的同时，我们还要准备好一些装柱用的工具和配件。填装需要的主要设备是一台小型抽气机，WATERS的那种很重的隔膜真空泵就很合用，我们实验室还有一种三角形的抽气泵，试过抽力不够，不好用。

　　其它配件包括两根硅胶管（一根50厘米，一根10厘米），一支橡胶棒（或套上输液管的木棒玻棒），一个装有滴定夹的滴定架，一个最小号的三角漏斗，一根干净竹签（或相近粗细的金属棍），小烧杯等。可以找一个干净搪瓷盘装起来。

　 当所有的准备工作都就绪后，我们就可以开始自己装柱了。

下面是具体步骤。

（1）　布置。

　　　找一张没有明显吹风的实验台，将滴定架和真空泵置于台面，再把空柱竖直夹架在滴定夹上，两端向上。带上一次性手套，将去活化的石英棉捏成长度约2 厘米长的条状，用干净竹签塞入空柱的接检测器那一端，深度约8－10厘米。

　（2）连接硅胶管。　

　　　10厘米的硅胶管一头插入小号的三角漏斗，另一头套在空柱进样口的一端，这样可能将空柱和小漏斗紧紧靠在一起，填料就是从这个小漏斗进入空柱的。把50厘米长的硅管一头接在空柱的接检测器一端，另一头接在抽气机的抽气管口上。

　（3）预填装

　　　取出装填料的试剂瓶，先倒一小部分在小烧杯里。再用小药勺挖1－2ml左右体积的填料在小漏斗中，用橡胶棒轻轻敲击10厘米的硅胶管，使填料滑入空柱管中，然后开动抽气机1秒钟马上再关闭，这时我们能看到这些少量填料能快速到达石英棉的位置，并开始形成一段栓塞。这一步骤要小心操作，抽得太长时间容易把石英棉也给吸进真空泵腔体中，太短时间又不足以形成栓塞。

　　刚开始装柱时经验不足，容易将担体吸进真空泵，这时可以在空柱检测器端那一头堵上几层纱布再接真空泵，就放心一些。想更放心，可以在柱后和真空泵之间连接一个玻璃缓冲瓶,不过如果操作熟练后就不需要这样做。

　（4）持续填装

　　　栓塞形成后，就可以持续开启抽气机了。在小漏斗里少量多次逐渐加入担体，并用橡胶棒慢慢敲击柱子的不同位置，哪里有空隙就敲哪里，使填料体积尽量收缩紧密，基本填满时停止加填料，仔细反复敲击柱子，担体紧缩一点就再加入一点，直至体积无法再收缩为止。如果是玻璃柱，最后进样口端填料的位置可以和进检测器端的填料相平（如果是不锈钢柱，则两端都填满至端口。）

　（5）后处理

　　关抽气机，拨掉进样口端的小漏斗，将去活化的石英棉捏成长度约2 厘米长的条状，用干净竹签塞入柱子接进样口那一端直至填料处，略微压紧。在柱子两端各套上一个胶圈，防止螺母落下时打碎柱，最后在柱子挂好金属标记牌，装入柱温箱中老化。

　（6）　老化

　　填充柱是需要老化的，目的就是去除在制备填料时可能残留的有机溶剂，所以老化时不装检测器，在柱温箱内放空。GC－9A的双U型柱一边长一边短，只能把长的那一端接在进样口，另一端放空。开机后，保持低载气流量，温度则每50度一个台阶，逐渐升高柱温，最高柱温设为比固定液最高使用温度低20　度左右。一般老化个一天时间就可以了。

上面填装柱的经验是指玻璃填充柱，填充柱还有一个很重要的类别，就是不锈钢填充柱。不锈钢比柱玻璃皮实很多，起码不怕钙不会折，可是在填装时看不到实际情况，只能慢慢少量多次直至装满为止。

　以上讲的是填充柱的装填法，以前曾经闲得无聊还自己试过做毛细管柱，居然最后也做成功了。毛细管柱的制作留至以后讲完气质联用的内容时再细说。

<继续写实验记录>

　GC－9A后面接着看LC－6A。

　　LC－6A在仪器室占满了一张三米宽的仪器台，因为部件太多了。它的具体配置在当时那个年代来看，可以用极尽奢华来形容：高压混合系统，三个液相泵，三个检测器（紫外，荧光，示差），大柱温箱，100位自动进样器,数据处理机，系统控制器。还有几个部件如溶液切换阀之类的，到最后也没有拆包装。配件更是多得温暖人心，十几箱各种各样的配件和耗材，数据处理机专用热敏纸就有好几箱，以至于最后处理机用残了还剩两大箱，想送人都没地方送。更值得一提的是那一大抽屉原装的岛津柱子，除了最常用的几根C18柱外，还有C8柱、氨基柱、氰基柱、硅胶柱各至少两根；另还有十几根长长短短的国产柱，估计是前几任使用者留下的，也不知道当年做什么项目。

　　看着抽屉里这些用途不明的液相柱子，再想想隔壁房间那些同样不明用途的气相柱子，使我不得不关注一个现实问题，那就是一个色谱实验室技术的传承。我不清楚其它地区的色谱行业传承如何，但是至少在广东，传承是相当不乐观的。因为经常有外单位的到我们这里学习，所以老是看到新面孔，尤其是企业实验室，一两年换一任是常态，经常前面的人还没做熟就又跑了，只有吃公家饭的色谱实验室情况略还好一些，不过想想我们这里那台GC－9A，十一年换了6　任保管人，也光彩不到哪里去。

　　不跑题了，继续看LC－6A，我认为LC－6A两个亮点是必须要提的。

　　第一点，系统控制器可以控制整台机器。

　　可以控制三元泵走不同的流量不同的梯度，可以控制柱温箱的温度，可以选择紫外检测器的波长。（不过，在紫外换到可见时，还是需要用手转一下检测器的旋钮）。还可以设好自动进样程序并启动自动进样器。甚至每个部件的电源都可以插在一起，一开系统控制器，每个部件的电源都启动了。

　　LC－6A是积木式设计，可以随意选装。可以选择只装一个或两个液相泵，也可以选择用或不用柱温箱，也可以选择手动进样或自动进样。这些改变，在系统控制器上可以直接适应。

　　第二点，模式的极大灵活性。

　　除了可以选择组装并变换不同的组件外，这台液相还有一牛B之处，就是只要把部件后面的电缆以不同的方式插拔，就能把系统控制器控制变成各部件独立控制。每个液相泵、柱温箱，检测器上都有设定装置。这样，万一系统控制器出了故障，马上就可以变成一套各组件独立控制运行的液相。

　　LC－6A这个积木，可以随便搭配，我做的最大的一次改变是试着把它拆成了两套液相色谱仪使用。一套是双泵、自动进样器加紫外检测器，另一套是单泵、手动进样器加荧光检测器，都可以正常用。不过后来觉得太无聊了又把它装了回去。

广东的发展水平的确是比其他地方高了不少，我们买的仪器通常就是一台仪器，耗材配件少之又少，上一辈传承也几乎没有，不过也没什么东西留下，自己要开展新项目或者专研其它，只能另外废很大劲跟领导申请。