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  • 有水有渝

    第11楼2012/05/24

    应助达人

    你的图还是看不了的，是不是可以考虑离子对色谱法？

    xubang123(xubang123) 发表:事实上，有些碱性条件看起来是可行的，实际操作中，可能因为这样那样的原因，可能还是无法行得通。碱性条件下，即使换柱子，调梯度，都是没有效果的。

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  • xubang123

    第12楼2012/05/31

    呵呵，质谱不能用磷酸类流动性的，这些算不易挥发，对质谱污染严重。0.1%的FA in water流动性倒是可以用，但由于化合物呈现留在状态在色谱柱上不易保留，从而导致和杂质的分离度不高，后来使用了阳性离子对试剂，才完成实验。一位老师给出的解释我贴出来和大家共享下：
    目标物上的N原子结合质子带上正电荷，这样极性增大，因而在反相柱没有较好的保留效果，因而峰型变差；而在碱性流动相条件下具有较好的峰型原因是：碱性条件抑制了N原子结合质子的能力，因而目标物以分子形式存在，使得在分离过程中能够得到较好的峰型。但由于硅羟基的次级保留作用导致目标物的残留比较大，所以这些目标物适合在酸性条件下加阳离子对试剂分离。

    pandora98(pandora98) 发表:建议试试酸性条件，pH2.2左右，0.1％磷酸正好，起始比例从100％水开始，waters的XTerra柱子正好。
    中性或弱酸性不足以抑制硅羟基。
    碱性条件一是柱子寿命受影响，即便是目前很多号称可以到pH到12的柱子也不好；其次，碱性条件经常靠流动相添加氨水得到，这样的基线重复性通常很差。

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  • pandora98

    第13楼2012/06/05

    问题解决了就好

    一般结构中含N的物质因为容易和色谱柱中的硅羟基发生作用导致保留降低，而杂化颗粒填料较好的解决了这个问题

    我推荐的是一根杂化颗粒的色谱柱，用0.1%的甲酸、乙酸或者三氟乙酸的流动相都比较合适，既增加保留又操作简便

    xubang123(xubang123) 发表:呵呵，质谱不能用磷酸类流动性的，这些算不易挥发，对质谱污染严重。0.1%的FA in water流动性倒是可以用，但由于化合物呈现留在状态在色谱柱上不易保留，从而导致和杂质的分离度不高，后来使用了阳性离子对试剂，才完成实验。一位老师给出的解释我贴出来和大家共享下：
    目标物上的N原子结合质子带上正电荷，这样极性增大，因而在反相柱没有较好的保留效果，因而峰型变差；而在碱性流动相条件下具有较好的峰型原因是：碱性条件抑制了N原子结合质子的能力，因而目标物以分子形式存在，使得在分离过程中能够得到较好的峰型。但由于硅羟基的次级保留作用导致目标物的残留比较大，所以这些目标物适合在酸性条件下加阳离子对试剂分离。

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  • 小虾米

    第14楼2012/08/05

    碱性柱的，也就300-400针的使用寿命。
    不止吧

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