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  • pandora98

    第12楼2009/06/22

    磷酸缓冲溶液特性:浓度变化10倍,ph值变化小于0.1。根据这个特性,可以参考网上的磷酸盐缓冲溶液配制方法来配制。
    或者配制两份等摩尔浓度的磷酸氢二钾和磷酸二氢钾溶液,边混合边测ph值,直到得到你所需要的。

    磷酸盐缓冲液的配制
    磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂,由于它们是二级解离,有二个pKa 值,所以用它们配制的缓冲液,pH 范围最宽:NaH2PO4: pKa1=2.12,pKa2=7.21; Na2HPO4:pKa1=7.21,pKa2=12.32
    配酸性缓冲液:用NaH2PO4,pH=1~4,
    配中性缓冲液:用混合的两种磷酸盐,pH=6~8,
    配碱性缓冲液:用Na2HPO4,pH=10~12。
    用钾盐比钠盐好,因为低温时钠盐难溶,钾盐易溶,但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时,只能用磷酸钠而不能用磷酸钾,因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。
    磷酸盐缓冲液的优点为:①容易配制成各种浓度的缓冲液;②适用的pH 范围宽;③pH 受温度的影响小;④缓冲液稀释后pH 变化小,如稀释10倍后pH 的变化小于0.1。
    其缺点为:①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀;②会抑制某些生物化学过程,如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用.
    pH    0.2mol/L NaH2PO4(ml)    0.2mol/L Na2HPO4(ml)
    5.7    93.5    6.5
    5.8    92.0    8.0
    5.9    90.0    10.0
    6.0    87.7    12.3
    6.1    85.0    15.0
    6.2    81.5    18.5
    6.3    77.5    22.5
    6.4    73.5    26.5
    6.5    68.5    31.5
    6.6    62.5    37.5
    6.7    56.5    43.5
    6.8    51.0    49.0
    6.9    45.0    55.0
    7.0    39.0    61.0
    7.1    33.0    67.0
    7.2    28.0    72.0
    7.3    23.0    67.0
    7.4    19.0    81.0
    7.5    16.0    84.0
    7.6    13.0    87.0
    7.7    10.5    89.5
    7.8    8.5    91.5
    7.9    7.0    93.0
    8.0    5.3    94.7




    Na2HPO4•2H2O分子量 = 178.05,0.2 mol/L溶液为85.61克/升。
    Na2HPO4•2H2O分子量 = 358.22,0.2 mol/L溶液为71.64克/升。
    Na2HPO4•2H2O分子量 = 156.03,0.2 mol/L溶液为31.21克/升.


    mhsr 发表:从文献上看到流动相用到磷酸盐(pH7.2),但不知道准确的配制方法,请高手指点一下

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  • 天赐甘露

    第13楼2009/06/23

    文献的东西有些就是做不出来,这个问题值得深思

    tyzxmht 发表:文献的东西不能全信.1,首先是文献的档次问题,我的经验是国标和外文的一般可行,中文的要是核心期刊的有80%的可信度,一般期刊的可信度就很低,也就10-20.
    2,看该方法是否也很多文献都提道,条件最一致的情况如何.

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  • huainanwang

    第14楼2009/07/23

    我的经验是先分别配置好如20mm的磷酸一氢钠和磷酸二氢钠,然后看你需要偏酸性还是碱性,如果是偏酸性多加点磷酸二氢钠,如果是偏碱性多加点磷酸一氢钠即可。

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  • huainanwang

    第14楼2009/07/23

    我的经验是先分别配置好如20mm的磷酸一氢钠和磷酸二氢钠,然后看你需要偏酸性还是碱性,如果是偏酸性多加点磷酸二氢钠,如果是偏碱性多加点磷酸一氢钠即可。

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  • huainanwang

    第14楼2009/07/23

    我的经验是先分别配置好如20mm的磷酸一氢钠和磷酸二氢钠,然后看你需要偏酸性还是碱性,如果是偏酸性多加点磷酸二氢钠,如果是偏碱性多加点磷酸一氢钠即可。

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  • 雾非雾

    第15楼2009/07/23

    应助达人

    日本官方农残检测方法里配磷酸盐缓冲液就是这样配的。

    huainanwang 发表:我的经验是先分别配置好如20mm的磷酸一氢钠和磷酸二氢钠,然后看你需要偏酸性还是碱性,如果是偏酸性多加点磷酸二氢钠,如果是偏碱性多加点磷酸一氢钠即可。

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  • Randy

    第16楼2009/07/23

    尽信国内标准和文献,不如没有!

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