pandora98
第12楼2009/06/22
磷酸缓冲溶液特性:浓度变化10倍,ph值变化小于0.1。根据这个特性,可以参考网上的磷酸盐缓冲溶液配制方法来配制。
或者配制两份等摩尔浓度的磷酸氢二钾和磷酸二氢钾溶液,边混合边测ph值,直到得到你所需要的。
磷酸盐缓冲液的配制
磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂,由于它们是二级解离,有二个pKa 值,所以用它们配制的缓冲液,pH 范围最宽:NaH2PO4: pKa1=2.12,pKa2=7.21; Na2HPO4:pKa1=7.21,pKa2=12.32
配酸性缓冲液:用NaH2PO4,pH=1~4,
配中性缓冲液:用混合的两种磷酸盐,pH=6~8,
配碱性缓冲液:用Na2HPO4,pH=10~12。
用钾盐比钠盐好,因为低温时钠盐难溶,钾盐易溶,但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时,只能用磷酸钠而不能用磷酸钾,因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。
磷酸盐缓冲液的优点为:①容易配制成各种浓度的缓冲液;②适用的pH 范围宽;③pH 受温度的影响小;④缓冲液稀释后pH 变化小,如稀释10倍后pH 的变化小于0.1。
其缺点为:①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀;②会抑制某些生物化学过程,如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用.
pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml) 0.2mol/L Na2HPO4(ml)
5.7 93.5 6.5
5.8 92.0 8.0
5.9 90.0 10.0
6.0 87.7 12.3
6.1 85.0 15.0
6.2 81.5 18.5
6.3 77.5 22.5
6.4 73.5 26.5
6.5 68.5 31.5
6.6 62.5 37.5
6.7 56.5 43.5
6.8 51.0 49.0
6.9 45.0 55.0
7.0 39.0 61.0
7.1 33.0 67.0
7.2 28.0 72.0
7.3 23.0 67.0
7.4 19.0 81.0
7.5 16.0 84.0
7.6 13.0 87.0
7.7 10.5 89.5
7.8 8.5 91.5
7.9 7.0 93.0
8.0 5.3 94.7
Na2HPO4•2H2O分子量 = 178.05,0.2 mol/L溶液为85.61克/升。
Na2HPO4•2H2O分子量 = 358.22,0.2 mol/L溶液为71.64克/升。
Na2HPO4•2H2O分子量 = 156.03,0.2 mol/L溶液为31.21克/升.