对于同一根色谱柱只要样品组分没有发生变化，在仪器条件没有变的情况下，用等度洗脱其保留时间不可能会出现那么大的变化。

流动相或样品的PH问题

流动相的问题的可能性大一些。

流动相问题,可能是长期不用纯有机相平衡的结果.柱子先用纯有机相冲一段时间,再换现在的流动相试试,应该可以改善,我以前也碰到过这种情况,用纯甲醇冲几个小时后就消除了.柱子不用时最好用甲醇平衡保存,(指常用反相C18柱,特殊柱子除外).

变化这么大。最好逐步检查检测条件、流动相、柱子

可以用标样检查一下柱效和仪器的定性重复性有没有问题

wbom 发表:请问，为什么我同一个样品的高效液相色谱出峰时间不一样？都是在同一个容量瓶里取的样。色谱图如下。