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  • shaweinan

    第11楼2006/04/15

    　　没看出楼主是用A泵走的缓冲盐，如果却是这样那是有问题，因为KH2PO4在水中的溶解度很大，但在乙腈中的却极小，很容易析出来，损伤输液泵和色谱柱；其次并不是所有的C18柱都能用纯水冲的，至少这样做会色谱柱不好，会影响色谱柱的使用寿命。

    sole 发表:　　今天我帮老师作了以KH2PO4缓冲盐以流动相的液相实验,做完30个样之后,我依照以前做过的方法,走了一下梯度,将流动相逐渐转换到纯乙腈溶液中.我的梯度是如下的方法:
    time flow 水(B泵) 乙腈(A泵)
    0 1ml/l 100 0
    15 1 100 0
    25 1 90 10
    75 1 90 10
    95 1 0 100
    125 1 0 100

    　　可是在走到95分钟,溶剂变为纯乙腈的时候, A泵突然降为0,此前A泵作为主泵,而且在走缓冲盐分析样品时,也走的是盐溶液,B泵一直走的是水,我试了几次,就是不行,A泵的压力始终在1左右跳动,也从排空阀抽气了几次,还是不行,最后将
    　　A B泵流动相互相调换,改为B泵走乙腈,A 泵走水相,B泵的压力才转化为正常,不过15分钟后,B泵的压力却比以前走纯乙腈时压力却高了一倍,那位高人指点一二,我的洗脱的方法不知道有没有问题?
    原文由 tanggangfeng 发表:　　不知道泵压为啥降为0。
    　　你可以试试不接柱子，用水走A泵。流速高点，2-3ml/min ,走一会再看看压力能否正常。
    　　但个人认为你梯度洗柱的方法不是很好。你A泵走缓冲盐，不应直接换乙腈。应该先换中性的水走一回，洗掉管路中的缓冲盐再换乙腈溶剂洗。
    　　再问一下，你的柱子是啥柱子，要用纯水冲，一般来说C18柱子，最好不要用纯水冲洗柱子，容易使柱子塌陷。

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  • fyjerke

    第12楼2006/04/15

    一般是不用纯水洗的，一般用替代法逐步洗出，最后逐步到50%以上的 乙请溶液

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  • 2006hbyh

    第13楼2006/04/15

    用纯乙腈作流动相冲洗机子很容易造成泵压为零，主要是单向阀的原因，把纯乙腈里加上一定比例的水就好了，

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  • 2271739

    第14楼2006/04/15

    拆掉柱子洗以下系统，然后换一柱子装上试试做个简单样品，流量正常出来，压力不对可能压力传感器坏了要换，如不能做，可以看一下单向阀，拆下来洗一下，或换．

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  • jenfer

    第15楼2006/04/15

    我也希望学习谢谢

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  • zhengshuchao

    第16楼2006/04/15

    我认为可能是由磷酸盐直接换成乙腈造成磷酸盐析出,从而使泵内漏.

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  • vipvisitor

    第17楼2006/04/15

    卸掉柱子看看!
    流速是否正常!
    再用水充分冲洗管路!
    相信就会有答案了!
    每次用过缓冲盐后的柱子和管路必须用水冲洗!你可以换流动相试验1

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  • 香帅

    第18楼2006/04/16

    单向阀脏了，用水清洗就行。

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