唉！文献上有许多东西无法令人相信！

按文献做不好实在是很正常的事。
如果你能按文献做的一模一样，大家就只要看一下文献就搞定了，那么有谁还会去买专利或技术转让呢？那知识产权怎么维护呀？
所以文献一般只是介绍一下一般方法，关键部分是不会公开的。你只能参考，不能照做的。

这就是所谓的学术腐败呀

不要说得太过份了。
当前学术腐败的现象是不少，应该批评！
但是文献的关键部分不公开应该是正常的，如果你花很多钱千辛万苦搞定了一个成果，会立即毫无保留地公开给大家去仿冒吗？
如果你花钱买了他的成果，然后再做不出，那才是假成果，才是腐败。

论文基本观点还是可信,多数东西还是要经过自己的思考才能使用.

同意有位朋友的说法，国内的文献基本不能直接用，顶多只能做一个参考，几乎没有文献的可以重复试验。国外的文献完全能重现的也不是很多，你看文献的话，必须集合一批文献一起看，这样可以参照其相同的部分。

文献中的流动相是甲醇-缓冲盐（5：95），冲洗时应该先用甲醇-水（5：95）冲40min，再用甲醇-水（70：30）冲一段时间。不知楼主是怎样操作的？

这个浓度我试试看看
已经一个星期了
我的柱子的病情不见好转啊
其实我洗柱子换了各种梯度洗过的
看看这个浓度持续洗段时间的效果如何了！
无论如何多谢您的建议

有点道理。
不过看来果冻的前处理颇有难度啊。

用甲醇可以洗到压力正常，换其他流动相就压力非常高了！????
为啥甲醇没问题，其他的溶剂用问题，乙腈也一样吗，压力很高哪？