应助达人

你的意思是你用的三根不同的柱子串联的？这样不是很好，是很有可能出现这样毛刺的情况， 因为他们分离的范围不一样，结构不一样，而且你做的曲线也不好呀

基线是不是放大后，有很多波浪形的起伏，看看是不是这些波动很象，频率基本一致，这一般是泵的脉动，查一下泵，比如单向阀，流动相没脱气等。

我觉得这个图的基线挺好的呀

你说的比较毛指的是27-30之间，还是30-35？

1. 如果是27-30，那是你样品的原因，你可以进个标样，看是不是还这么毛？

2. 如果是30-35，那是溶剂峰，你用流动相配制样品溶液，看能不能好点？

图里是保留体积还是保留时间？测试流速是多少？



就这个图而言，基线还是比较好的。 后面的峰可能是你用缓冲盐，溶解的样品溶剂和流动相有一定的差别，所以造成的倒峰，主峰的后延峰就需要分析是你样品不纯的原因，有较小分子，还是什么原因，但看出峰时间判断，若你用的是2根柱子，应该是柱子不适合分析了，或者你的流速是更低的？三个柱子也觉得应该选择能分析更小分子量的柱子更适合。[/quote]

我是三根柱子串联的，100-5000、5000-30000和5000-600000的，但之前做的谱图的基线都比较平整，不会出现现在的一起一伏的，所以想搞清楚原因！[/quote]

你的意思是你用的三根不同的柱子串联的？这样不是很好，是很有可能出现这样毛刺的情况， 因为他们分离的范围不一样，结构不一样，而且你做的曲线也不好呀[/quote]

yuanlidi(yuanlidi) 发表:

就是这样的图，谢谢！有些还要严重！

班门弄一下斧头

从GPC曲线看

1）样品浓度有点大（或者进样多了），信号强度稍微高了些。浓度过大的后果，会造成分子量分布加宽。应注意。

2）基线问题：该基线波动，应该不是气泡引起的，否则应该有规律的气泡峰。好像也不是毛刺，而是有规律的波动，我们好像也遇见过，应该不是大问题，应该能通过泵排气、进样器排气和清洗，监测器切换、平衡得以解决。

3）如果基线频繁出现毛刺，有可能是检测器管路的密封出了问题。

仅供参考~

应助达人

大姐是如何一看就知道他进样超过柱容量了？一定要教教我们。

闻禾(phillis) 发表:

班门弄一下斧头

从GPC曲线看

1）样品浓度有点大（或者进样多了），信号强度稍微高了些。浓度过大的后果，会造成分子量分布加宽。应注意。

2）基线问题：该基线波动，应该不是气泡引起的，否则应该有规律的气泡峰。好像也不是毛刺，而是有规律的波动，我们好像也遇见过，应该不是大问题，应该能通过泵排气、进样器排气和清洗，监测器切换、平衡得以解决。

3）如果基线频繁出现毛刺，有可能是检测器管路的密封出了问题。

仅供参考~

进样量的大小从信号强度看啊。
另外，如果浓度太大或进样太多，引起峰展宽比较严重的话，峰强度可能反倒会降低一些，但峰面积会挺身"补强"。
另外楼主实验用的流动相是THF吧？溶剂用前是否经过处理？样品的GPC峰拖尾部分，可能与溶剂的抗氧剂峰重叠，这个原因可考虑一下。

因为保留时间过长所以说过载吗？

闻禾(phillis) 发表:

班门弄一下斧头

从GPC曲线看

1）样品浓度有点大（或者进样多了），信号强度稍微高了些。浓度过大的后果，会造成分子量分布加宽。应注意。

2）基线问题：该基线波动，应该不是气泡引起的，否则应该有规律的气泡峰。好像也不是毛刺，而是有规律的波动，我们好像也遇见过，应该不是大问题，应该能通过泵排气、进样器排气和清洗，监测器切换、平衡得以解决。

3）如果基线频繁出现毛刺，有可能是检测器管路的密封出了问题。

仅供参考~