yzulcl
第13楼2013/01/10
在不脱气的前提条件下(水里面会溶解有大量的空气):
如果是低压混合,直接泵头上就有气泡了,泵压不稳,很容易发现问题。
如果是高压混合,由于高压的存在,(两个泵)泵头上不会有气泡,甚至柱头上也不会有气泡,因此泵压稳定,但是到了柱后,高压不复存在,气泡就一定会出来,导致检测器的基线不平稳。
解决的方案:要么先脱气(加装在线脱气机),要么老老实实先手动混合超声脱气,然后单泵走等度。
楼主如果无法加装在线脱气机,但是想要享受在线混合的便利(手动混合没法走梯度啊),有一个折中的方案:
不要用纯水。100ml甲醇和900ml纯水混合,然后超声半小时,然后用这个代替纯水,然后就算没有脱气机,在线混合也不会有大问题,梯度照样可以走。如果你的梯度是从30%甲醇开始的,那就用300+700的来代替。唯一的缺点就是混合比例的换算不太方便,混合比例也会有误差。
ghost307
第14楼2013/01/11
220nm的波长,你用50%的甲醇作为流动相(甲醇比例太高),这个方法不太合适,因为甲醇在低波长下吸收值太大,导致基线噪音太大(通常样品检测限也是很低的),这跟压力、平衡时间都是没有关系的,你平衡再久也都一样。
解决办法:1.改变检测波长(波长更大)
2.如果波长不能改变,换流动相,改用截止吸收波长更低的乙腈