各位大侠，我用的是Waters2475紫外检测器，手动进样器，定量环200uL的，已经是我们手头的最大的定量环了，如果说系统有漏液，阀切换不准确，那之前做曲线也应该不正常吧，线性也不会好的，可是我做的曲线是可以的，起初我也怀疑柱子，可是换了一根同类型的柱子后，结果还是如我所疑惑的一样，真是不知哪里有问题？

加标浓度太小了，本底太大，除了没有贡献目标物浓度，反而起了稀释的作用

“加标浓度太小了，本底太大，除了没有贡献目标物浓度，反而起了稀释的作用”，这个解释是不成立的，同样的样品，同样的加标样品，在Agilent1260上的结果很正常，可在Waters上的老是如我所疑惑的？？？

请问各位大侠，在Agilent1260仪器上打出的校正曲线里的 Residual Std.Dev.:16.83814；还有实验项目如PC，PC at exp.RT:12.066，是什么意思，有何作用，在Waters仪器上没有看到此项信息啊？？？

应助达人

应该考虑分析条件对VB12稳定性的影响。

探讨了光照、pH值、温度、金属离子及糖品种类和浓度等因素对维生素B12的影响。光照条件下存放3-10天，葡萄糖等六种糖品的添加对维生素B12都有不同程度的降解，其中低聚半乳糖、低聚异麦芽糖和麦芽糖的作用显著，而在避光存放过程中维生素B12均无明显变化；同一种糖液（葡萄糖或蔗糖），pH值越低，维生素B12降解越快。低pH值（1-3）时，pH值是降解的主要因素，pH值增加到5时，糖类对维生素B12的降解速率起主导作用。5～55℃储藏条件下蔗糖溶液中维生素B12的含量没有明显的减少。Cu、Fe、Zn、K、Na等金属离子对维生素B12影响程度不同，与糖的存在无明显关系。维生素B12的降解速率随着葡萄糖浓度的增加先升（1～5％）后降（5～25％）；蔗糖溶液中维生素B12的降解速率也随蔗糖浓度增加先升（1～10％）后降（10～25％）。
　　 维生素B12在糖液中光解生成羟钴胺素，其在葡萄糖、蔗糖、麦芽糖和果糖等几种糖液中的动力学方程为假一级反应。在100％DMSO溶剂中，添加10％葡萄糖的维生素B12几乎未发生光解，而在DMSO-水（8：2，v：v）溶剂中，添加10％葡萄糖时维生素B12的降解速率远低于100％水溶剂中维生素B12的降解速率。
　　 0.1％亚硫酸钠、硫代硫酸钠、硫酸铵、苯甲酸钠和0．01％的亚硝酸钠等食品添加剂对维生素B12没有稳定作用。0.1％的卡拉胶、琼脂、海藻酸钠、黄原胶和瓜尔豆胶等食用胶对糖液中维生素B12也不具保护作用。凝胶态食用胶比液态有利于葡萄糖或蔗糖溶液中维生素B12的保护。卡拉胶凝胶和琼脂凝胶对10％葡萄糖溶液中维生素B12的降解率分别为41.64％、52.74％，低于10％葡萄糖溶液中维生素B12的降解率（56.14％）；卡拉胶凝胶和琼脂凝胶对10％蔗糖溶液中维生素B12的降解率分别为19.03％、8.52％，低于10％蔗糖溶液中维生素B12的降解率（21.61％）。

请问各位大侠，在Agilent1260仪器上打出的校正曲线里的 Residual Std.Dev.:16.83814；还有实验项目如PC，PC at exp.RT:12.066，是什么意思，有何作用，在Waters仪器上没有看到此项信息啊？？？

你的样品瓶中看看有没有进气泡。也有可能是进样器中有气泡，你连续进几针样加标，峰面积是否基本相同呢，

VB12操作时应避光操作，否则容易发生降解。不知你是否避光操作了？

称量用棕色容量瓶并放置在暗处。