柱前衍生高效液相色谱法对动物组织中胶原蛋白的测定

动物组织中的胶原蛋白经酸水解后生成包括羟脯氨酸在内的氨基酸混合物，用邻苯二 甲醛( O P A) 与其中的一级氨基酸衍生，再用9 一 芴基甲氧基羰酰氯( F MO C ) 与其中的羟脯氨酸衍生，用反相高效液相色谱法测定羟脯氨酸含量。羟脯氨酸是胶原蛋白的特异性氨基酸且含量稳定，因而可通过样品中羟脯氨酸的含量计算胶原蛋白含量。在 0 ． O 1 ～ 5 0 m g· L 范围内，羟脯氨酸的峰面积和质量浓度之间的相关系数为 0 ． 9 9 9 3 ，保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为 0 ． 3 0 ％和 2 ． 9 ％ 。该法选用 F MO C与氨基酸衍生产物的特征波长检测，能够完全屏蔽一级氨基酸衍生物的干扰，可快速 、准确、高效地测定羟脯氨酸及胶原蛋白的含量。

色谱-串联质谱分析

通过埘提取大鼠脑组织总蛋白不同方法的研究， 建立提取脑组织总蛋白的标准方 法。方法 在本实验中分别用总蛋白提取试剂盒和 自制裂解液提取脑组织总蛋 白， 测量蛋白浓度。用体积排阻色谱( S E C) 分离后分别进行基质辅助激光电离飞行时间质谱( MA L D I — T O F — M S ) 做蛋白全谱。结果 总蛋白提取试剂盒和自制裂解液总蛋白提取量分别为： ( 5 ． 6± 0 ． 2 ) mg 、 ( 6 ． 7±0 ． 5 ) m g ， M A L D I — T O F — MS蛋白全谱的谱峰数分别为( 3 0 4． 2± 2 2 ． 3 ) 和( 3 3 1 ． 6± 3 0 ． 5 ) 个。结论 自制裂解液与 常规的总蛋白提取试剂盒相比具有蛋白提取率高、 蛋白溶解性好等优点。

楼主：
我不要你的积分，支持你是因为你开了个好头。借这个机会，与大家交流一下蛋白质的检测方法，我也收获许多。
一提起蛋白质的测定，大家习惯的想到K式，其实，还有许多我们食品不常见的方法应用在不同领域。
现在的研究在交叉领域方面能出成绩，希望大家相互借鉴，共同进步。

我们现在就用自动凯式、近红外漫反射光谱、杜马斯燃烧3种方法测定蛋白质，比色法比较麻烦。

省下了！ 不过我觉的你说的特对！ 支持！支持！支持！支持！支持！支持！支持！支持！支持！支持！

作为生物学出身的人，第一反应就是做个Western Blotting。
因为WB是检测蛋白与抗体之间的特异反应，所以不管你是三聚氰胺也好，尿素也好，甚至是皮革水解蛋白也好。统统都是不反应的。
不过看牛奶蛋白并不是单一蛋白，度娘说由酪蛋白（casein）和乳清蛋白（lactoal-bumin）两大部分组成。前者为牛奶在20℃，PH值4.6条件下沉淀下来的蛋白质，余下溶解于乳清的蛋白质均称为乳清蛋白。乳清蛋白则包括β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、血清白蛋白和免疫球蛋白及其他微量蛋白，如含铜、锌-超氧化物歧化酶等。
所以除非国家能够对不同属地的牛奶做大样本分析并得出标准，这方法估计没用。
还有，基本上一次实验要两天时间，而且可能会莫名的失败。可能需要上平行实验。

是的

是滴

是滴

特异性强，对于营养学来说，太受限制。