你的流动相是怎么配置的 用的是高压泵还是低压梯度混合？
标准品可以不过柱子，实验室应该测定回收率，以确定方法操作准确性

可能的原因：

1.色谱柱或保护柱污染。

2.色谱柱填料因震动而塌陷

3.样品溶剂与流动相不互溶。

标样要是需要过柱的话方法里应该指出呀