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  • 菜头

    第21楼2013/06/21

    有道理的。

    我前几天也写点关于这种现象的分析材料，由于事情多，忘记提交回复了。

    zy178(zy178) 发表:从谱图上看，除了柱效逐渐变低，出峰时间也有少许提前，那单从出峰时间提前这个现象稍作分析：

    这个实验的流动相为水-乙腈（90：10），就C18的特性，流动相中加入甲醇（相对水来说是强洗脱剂），样品组份出峰时间会提前，那么样品中加入了甲醇之后也同样能够起到出峰时间提前，所以我假设了一个造成此现象的原因：样品中的溶剂会影响柱头阶段样品与固定相之间的分配平衡。

    该样品由展青霉素和甲醇水组成，在进样后会同时输送到色谱柱，在刚进色谱柱的瞬间，柱头的环境为展青霉素在流动相和甲醇水及固定相中进行分配，在此微环境中，甲醇水的量足以明显的影响到标准品的分配，相当于在流动相中加入了一定的甲醇，所以导致了峰型差，保留时间提前。随着流动相的继续向前推进，甲醇与展青霉素在过了柱头后被分开，又恢复到了之前的分配平衡中，但是由于柱头那段微环境的影响，柱效已经被破坏。

    按照上述这个假设，随着溶剂中甲醇量的增加，柱效下降，出峰时间提前也就可以解释了。

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  • zy178

    第22楼2013/06/21

    有道理的。

    我前几天也写点关于这种现象的分析材料，由于事情多，忘记提交回复了。[/quote]

    菜头老师贴出来让大家学习一下吧！

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  • lwzzyj

    第23楼2013/06/22

    我觉得这和区带扩散有关，有机溶剂与水的粘度不同，在相同流速下层流的压力不同，导致两种不同的结果，纯水进样，区带被前后流动相压缩，纯有机溶剂进样，区带挤压前后的流动相，扩散掉了。

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  • vcningmeng

    第24楼2013/06/25

    有点深奥，看的不是很懂

    lwzzyj(lwzzyj) 发表:我觉得这和区带扩散有关，有机溶剂与水的粘度不同，在相同流速下层流的压力不同，导致两种不同的结果，纯水进样，区带被前后流动相压缩，纯有机溶剂进样，区带挤压前后的流动相，扩散掉了。

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  • zy178

    第25楼2013/06/25

    昨天有同事做苏丹红，流动相为95%乙腈水，我就试了试苏丹红2的溶剂效应，选择了几种溶剂配置样品：甲醇、乙腈、氯仿、甲苯、正己烷（极性由高到低），其中前4种与流动相互溶，而正己烷与流动相不互溶。

    甲醇和乙腈的出峰正常（5-6min)；

    氯仿的没有出峰，只是在2min之前有个很丑的峰；

    甲苯的出现分叉（4-6min）

    正己烷有肩峰（4-5min)

    vcningmeng(vcningmeng) 发表:以前做过苏丹红的实验，国标中标准溶液是用正己烷配置的，进样出来的峰很小；最后用流动相配置，一切OK

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  • 菜头

    第26楼2013/06/25

    因为流动相是95%的乙腈，所以定溶液用甲醇或者乙腈肯定没问题的。

    正己烷与乙腈不互溶，是进样溶液的大忌。

    氯仿、甲苯极性远小于乙腈，用于做这个体系的进样溶液，出峰会提前，并峰型不好。

    zy178(zy178) 发表:昨天有同事做苏丹红，流动相为95%乙腈水，我就试了试苏丹红2的溶剂效应，选择了几种溶剂配置样品：甲醇、乙腈、氯仿、甲苯、正己烷（极性由高到低），其中前4种与流动相互溶，而正己烷与流动相不互溶。

    甲醇和乙腈的出峰正常（5-6min)；

    氯仿的没有出峰，只是在2min之前有个很丑的峰；

    甲苯的出现分叉（4-6min）

    正己烷有肩峰（4-5min)

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  • 尘

    第27楼2013/06/30

    是的，很多时候我们都要求基体匹配

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  • houjjun

    第28楼2013/06/30

    有时确实没影响，有时确实有。

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  • houjjun

    第29楼2013/06/30

    有的标准上明确说明用什么流动相定容，有的好像也不太合适。楼主以上这个实验很有说服力

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  • houjjun

    第30楼2013/06/30

    这个可能也和色谱条件有关，比如检测波长

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