必须是梯度的问题。

为什么等度方法的基线是一条直线，为什么梯度方法基线基本没有平的？这是由于UV检测器检测的是流经流通池的流动相的吸光度，流动相比例改变了，吸光度也跟着改变，所以基线就会漂移。样品出峰也是这个道理。如果你流动相比例很缓慢的改变，那么你的基线也会漂移的很慢；而如果你在很短的时间内大比例的改变了流动相的比例，流经流通池的流动相吸光度也就很快变化，就会出现贴图中的情况。
当然，如果流动相AB两相吸收很接近的话，那么急速改变比例，吸光度变化也不会很大。但是，楼主你可以去查查甘氨酸合磷酸的截止波长，它们相差很多的。
楼主的梯度是在4.5min开始改变梯度，色谱图中陡坡出现在6.5min。不信楼主可以试试，改在5.5min开始改变梯度，看是不是在7.5min出现陡坡，如果是，那么就是我对了。

梯度这种情况很正常，再则流动向比例不同，吸收相应也不同！

应助达人

绝对是正常现象。你的流动相里面添加的东西，一个是磷酸，另一个是甘氨酸，这两者的紫外吸收不一样。这是280nm的波长，差异比较小，如果是220nm，差异就大多了。

如果两种流动相里面都用磷酸缓冲，基线就不会有这么明显的差异了。