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  • 菜头

    第11楼2014/04/08

    哈哈,还真有较真的人。
    早就发现酶浓度不一样了,我们是按那个量少的加的。
    其实,就是不加,结果也不会差的。

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  • 慕枫

    第12楼2014/04/08

    我记着瘦肉精和莱克多巴胺这两种物质中有一种是结合在猪肉蛋白上的,不酶解的话貌似测不出来的,脱离好久记不清楚了。

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  • 初晶古恒

    第13楼2014/04/17

    感谢大神的细致分析,这么说来这个酶在GB/T 22286-2008中的“10000units/mg"和GB/T 21313-2007中的”30U/mL“的单位都标错了,GB/T 22286-2008应该标为中的“10000units/mL",而GB/T 21313-2007应该标为”30U/uL“。

    qzxmsy(qzxmsy) 发表:第一点:找度娘了解了一下,unit就是单位的意思,那么也可以理解为就是U。
    第二点:抛开这两个标准,我们再来看看SN/T1924-2007《进出口动物源性食品中克伦特罗,莱克多巴胺,沙丁胺醇,特布他林残留量的检测-液相色谱-质谱法》的描述:β-盐酸葡萄糖醛甙酶-芳基硫酸酯酶:含β-盐酸葡萄糖醛甙酶134600U/mL,芳基硫酸酯酶5200U/mL。如果合并计算的话含量则为139800U/mL,即1139.8U/uL。该标准在提取过程中说明10g样品用量为50uL,即酶用量为6990U。
    现在回过头来看上述两个标准:
    GB/T 22286-2008 《动物源性食品中多种β-受体激动剂残留量的测定 液相色谱串联质谱法》规定2g样品用酶500U,折算成10g样品需要酶2500U。
    GB/T 21313-2007《动物源性食品中β-受体激动剂残留检测方法 液相色谱-质谱/质谱法》规定10g样品用酶100uL,假设酶的含量为30U/uL(注意:这是的单位是U/uL,即认为制订标准的同志出现笔误了!),那么酶的用量就是3000U。这个水平与SN/T1924-2007、GB/T22286-2008比较接近!
    综上所述,可以得出以下几个结论:
    1.GB/T21313-2007在酶的规格上出现重大失误,应该是30U/uL,即30000U/mL。
    2.在莱克多巴胺的酶解方面,酶的用量为每10g样品加酶2500-7000U左右。
    查了一些色谱试剂供应商的资料,每100KU价格在800元左右,折算到每个样品约20-60元,确实不算便宜。可能的话,建议适当降低酶用量,毕竟目前样品中莱克多巴胺基本是没有的。如果检出莱克多巴胺含量较高的话,建议提高酶用量再检一次。

    附:在查阅资料的时候发现,农业部数个公告虽然规定了酶的用量,但却未明确酶的规格(含量),这样的标准让标准的使用者情何以堪!

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  • 初晶古恒

    第14楼2014/04/17

    呵呵,确实是有点较真了。不知道这个酶解的步骤是不是参考国外标准或者文献过来的,国内是否真有人用瘦肉精喂猪后宰了,拿实际阳性样品来做瘦肉精检测方法的建立和验证呢?

    菜头(laohutushen) 发表:哈哈,还真有较真的人。
    早就发现酶浓度不一样了,我们是按那个量少的加的。

    其实,就是不加,结果也不会差的。

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  • ie4680180

    第15楼2014/04/21

    应助达人

    呵呵,老兄可以试一试啊。

    初晶古恒(zrtt) 发表:呵呵,确实是有点较真了。不知道这个酶解的步骤是不是参考国外标准或者文献过来的,国内是否真有人用瘦肉精喂猪后宰了,拿实际阳性样品来做瘦肉精检测方法的建立和验证呢?

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  • we-july

    第16楼2014/08/09

    不加酶的话,莱克多巴胺的回收率做不好。

    我们一般5g样品,加50-60ul酶液。酶的效价是100000u/ml左右。

    国标应该是可以稍微调整的吧?毕竟不同的样品基质,有的脂肪多,有的肌肉多,还有的是纯油脂,差异性很大,想要回收率达标,加试剂量肯定不能完全一样。

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