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  • mulder_shen

    第11楼2014/09/27

    超高效液相色谱柱(UPLC)里装填的填料粒径更小,常见的为1.7um,较小的粒径使得该色谱柱与常规高效液相色谱柱(HPLC)比,具有单位长度内更高的塔板数,从而使样品达到更好的分离。但是在粒径更小的情况下,要达到合适的流速,就需要更大的压力。同时由于其高塔板数,使得短时间内在HPLC上分不开的样品可以在短时间内被UPLC分开。

    因此UPLC优点:高效(高塔板数),高速(分离时间短)

    UPLC缺点:高压

    优点上面已经分析过了,下面重点分析缺点。高压使得UPLC的各种零部件要比HPLC的要更结实,造价也就相应更高些,而且高压下零件的使用寿命往往更短些,同时保养,维护也需要更小心。

    接下来谈谈替代性的问题,色谱最终追求的目标是达到较好的分离度,而影响分离度的因素除了塔板数以外,还有容量因子和选择性。也就是说塔板数提高并不是影响分离度唯一的因素,况且HPLC的柱效(塔板数)通常已经达到了较高的水平,对于大多数常见样品的分离已经达到了足够的水平。对于难分离的样品不一定非要采取UPLC(即依靠提高塔板数来解决)。完全可以通过依靠改变色谱柱分离模式,改变流动相pH,添加缓冲盐等方法来解决。

    因此,UPLC的使用条件及价格等的限制,使其不能替代HPLC,反而HPLC在正确的使用下(色谱模式及流动相条件),基本可以达到我们要求的效果。所以在不具备HPLC的情况下,还是购买HPLC比较好,相信一定能满足你们基本的要求。

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  • bless_99

    第12楼2014/09/28

    UPLC比HPLC,柱子变短了,颗粒变小了,出峰时间快了,更容易堵了!更难侍候了!更矫情了!容不下一点“沙子”了!

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