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  • lingyou

    第11楼2015/03/05

    是离心管脱盐,怀疑是离心管漏了导致的。但是离心管是一次性的,这次测了下次也不能保证。如果每次都测,太浪费样品。

    zyma_100(v2681763) 发表: 比例的话我觉得只要在范围内对检测结果影响不大
    至于脱盐后复溶,要取决你脱盐的方式,是用离心浓缩管脱盐吗?我看你上面提到脱盐后没有测定蛋白浓度,测定时候发现峰面积变小,我认为还是经过脱盐处理后蛋白有损失造成的,你可以脱盐后复溶于水,然后测定浓度比较一下脱盐前后有无差别。

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  • zyma_100

    第12楼2015/03/05

    应该是蛋白粘在了滤膜上,每次蛋白损失随机,所以浓缩/脱盐后一定要测定浓度

    lingyou(v2983592) 发表: 是离心管脱盐,怀疑是离心管漏了导致的。但是离心管是一次性的,这次测了下次也不能保证。如果每次都测,太浪费样品。

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  • lingyou

    第13楼2015/03/06

    好吧,看来要考虑不脱盐。不知道您做不做cIEF?这个实验的样品可以不脱盐吗

    zyma_100(v2681763) 发表: 应该是蛋白粘在了滤膜上,每次蛋白损失随机,所以浓缩/脱盐后一定要测定浓度

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  • zyma_100

    第14楼2015/03/06

    cIEF要脱盐的,盐浓度过高会导致电流过高,烧坏涂层

    lingyou(v2983592) 发表: 好吧,看来要考虑不脱盐。不知道您做不做cIEF?这个实验的样品可以不脱盐吗

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  • lingyou

    第15楼2015/03/06

    过高是多高呢?我看说明里写的也是超过50mM需要脱盐,跟CE-SDS要求是一样的

    zyma_100(v2681763) 发表: cIEF要脱盐的,盐浓度过高会导致电流过高,烧坏涂层

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  • zyma_100

    第16楼2015/03/06

    我记得是cIEF要求<50mM,CE-SDS没有要求。一般cIEF电流不要超过25

    lingyou(v2983592) 发表: 过高是多高呢?我看说明里写的也是超过50mM需要脱盐,跟CE-SDS要求是一样的

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  • lingyou

    第17楼2015/03/09

    了解了。tank you~~

    zyma_100(v2681763) 发表: 我记得是cIEF要求<50mM,CE-SDS没有要求。一般cIEF电流不要超过25

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  • CEcret

    第18楼2015/03/09

    CESDS要求<50mM的。除非你的样品很浓,加入的体积较小。
    参见下面的话:
    If the sample concentration is less than 10 mg/mL and the buffer concentration is more than 50 mM,
    then the buffer of the IgG sample must be exchanged with SDS-MW Sample Buffer by using the Centricon
    YM- 30 centrifuge filter unit.

    lingyou(v2983592) 发表: 了解了。tank you~~

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  • lingyou

    第19楼2015/03/09

    我也记得是的,一时没找到在哪。谢谢~~
    另外最近condition电流图正常但是曲线图不正常应该怎么办??shutdown也是。我酸碱冲洗过了,反复的condition也没有效果。然后检测的时候前几分钟的基线就不平。虽然不影响检测,可是很不爽

    CEcret(v2812644) 发表: CESDS要求<50mM的。除非你的样品很浓,加入的体积较小。
    参见下面的话:
    If the sample concentration is less than 10 mg/mL and the buffer concentration is more than 50 mM,
    then the buffer of the IgG sample must be exchanged with SDS-MW Sample Buffer by using the Centricon
    YM- 30 centrifuge filter unit.

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