流动相是 甲醇：水：冰醋酸
具体比例我记得不是很清楚，好像是27-71，能确定的是甲醇+水是97，还有3是冰醋酸。
加这么多酸我也很诧异，我配完了流动相测过ph，大约在2.6左右。
今天在实验室试了试单进苯甲酸，重现性还是不行，同一进样瓶重复进样，7针7个值，有点没招了。
现在能确定，这次实验，内标物苯甲酸在药典色谱条件，预处理下的重现性很差。
上万方查了下，有论文说不用加内标也能做，但gmp认证总得按照药典走把，明天再去实验室试试。

不知对内标的重现性有无具体要求？

应助达人

内标是内标法定量的根本，重复性必须好。

应助达人

时间间隔是多少，平横了多久，手动进样还是自动，

平衡半小时 第一针标样不用 第二针再进那个标样 开始实验。
waters2695 自动进样

应助达人

内标必须要重现性好

应助达人

能否再上个谱图看一下，苯甲酸在该流动相的出峰状况。由于有冰乙酸的加入，注意流动相的密封以及色谱柱的平衡时间，半个小时不一定够

很久没更新了，最近很忙，该问题已解决。
说来无奈又好笑，解决的办法换了跟柱子，没事了。
换了跟汉邦的li**her填料的柱子，倒不是不告诉大家，不记得这玩意怎么拼。
明天我抄下来，跟版里师兄交流下填料的问题。

此为之前被坑许久的柱子，

这张图中，上面这根就是汉邦的，用它做没有任何问题。

两根柱子填料分别为：
汉邦Lichrospher C18
Accurasil C18

色谱柱对峰面积的影响有这么大吗，以前还真没有见到过。不过我始终怀疑这个有问题的色谱柱是不是曾经用过离子对。