5分钟左右的是主要峰，但是现在此峰不知道是不是单一峰，含不含其它杂质

这几个物质差不多都是偏酸性吧，建议使用酸性流动相。简单点的可以用0.1%磷酸，麻烦点的可以用10mM磷酸二氢钾，调pH3.0。这样主峰保留会增强，峰形和分离度应该也能改善。

开始我也是这么想的，但是酸性pH值下峰型很难看，拖尾特别严重，我也纳闷怎么回事，等我找找图，上个图

你这图用的流动相pH是多少的？应该是pKa做的恶，继续调低或调高就是了。

你这物质应该是两性的吧，调解下流动相pH值应该会改善峰形。查查文献或者pka值，类似结构的物质是用的pH多少的流动相。

能量低，噪音会增大，仪器灵敏度会下降。 你这个不到新灯能量的1/2，也许还能勉强一用（低浓度样品就更困难）。 比较关键的是能量不到一半时，开机能够自检正常并能正确定位波长么？ 个人不太清楚岛津的开机自检的程序过程，但是国内的仪器设计，如果氘灯能量过低到一定范围，开机有可能找不到正确波长

根据你的说法，氘灯换了刚半年，分析氘灯本身的能量弱的可能性较小，而是光路老化或者需要重新校正。 http://bbs.instrument.com.cn/topic/5866531 这篇帖子，有老师讲的很详尽。

应助达人

为什么不考虑用等度洗脱，那样后面的基线漂移的积分就没有了。样品经过稀释了么，如果是稀释尽量用流动相定容。

应助达人

检测波长可能不是最佳波长，最好做各物质的波长扫描。拖尾用点三乙胺。

1、流动相，不加离子对，峰型会不好，因为你的样品是有酸碱性的。
建议查一下：主要产物及杂质的pKa，应该接近，但不能影响溶解度。
2、梯度：ODS色谱柱，不建议用100%纯水，会影响色谱柱的平衡，色谱峰基线会不稳定，并且重复性会变差。
建议：流动相从5%乙腈开始。
3、如果空白梯度中有杂峰，说明流动相有问题，因为，该柱以及该条件，应该是可以得到相当平稳的基线。
建议：更换更高级别的水。（一般是水中含有痕量杂质）
4、四分钟左右的峰应该是溶剂峰，如果要判定该峰中是否含有你的产物或者杂质，则要用纯品去测试。
建议：找该产物及杂质的纯品，测试标记峰的位置。如果没有，则可以通过测试，含更低含量的乙腈起始（如0%，与第二点反了，只在方法摸索阶段使用）来拆分。