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第11楼2016/08/23
样品前处理:
1、提取 称取10 g 蜂蜜于50 mL 离心管中,加入10 mL 水,于涡旋混合器上混合3 min,待样品完全溶解后加入20 mL 乙酸乙酯,高速涡旋混合5 min,3000rpm 下离心5 min,上层溶液转入100 mL 烧瓶中。下层溶液再加入20 mL 乙酸乙酯,高速涡旋混合5 min,3000 rpm 下离心5 min,合并两次上层液于同一烧瓶中,减压浓缩至干,用3?1 mL 20% 的甲醇水溶液溶解残渣,待净化。
2、净化
a 活化: 依次用3 mL 甲醇和3 mL 水活化ProElut PLS 60 mg/3 mL (Cat.#68003),流出液弃去;
b 上样: 将待净化的样品液加入柱中,流出液弃去;
c 淋洗: 用3 mL 20% 甲醇水溶液淋洗,淋洗液弃去,并将PLS 柱抽干;
d 洗脱: 用3 mL 甲醇洗脱,收集洗脱液;
e 重新溶解:在40 ℃ 下用氮气将洗脱液吹至近干,然后用1 mL 40% 甲醇水溶液定容,供HPLC 分析
色谱条件:色谱柱:Diamonsil C18(2) 250 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99603) 色谱柱:Diamonsil C18(2) 250 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99603) 流动相:甲醇/ 水=40/60 (V/V) 流速:1 mL/min 进样量:20 μL 柱温:30 oC 检测器:UV 280 nm
sixingxing
第16楼2016/08/23
1、提取 称取10 g 蜂蜜于50 mL 离心管中,加入10 mL 水,于涡旋混合器上混合3 min,待样品完全溶解后加入20 mL 乙酸乙酯,高速涡旋混合5 min,3000rpm 下离心5 min,上层溶液转入100 mL 烧瓶中。下层溶液再加入20 mL 乙酸乙酯,高速涡旋混合5 min,3000 rpm 下离心5 min,合并两次上层液于同一烧瓶中,减压浓缩至干,用3?1 mL 20% 的甲醇水溶液溶解残渣,待净化。
2、净化
a 活化: 依次用3 mL 甲醇和3 mL 水活化ProElut PLS 60 mg/3 mL (Cat.#68003),流出液弃去;
b 上样: 将待净化的样品液加入柱中,流出液弃去;
c 淋洗: 用3 mL 20% 甲醇水溶液淋洗,淋洗液弃去,并将PLS 柱抽干;
d 洗脱: 用3 mL 甲醇洗脱,收集洗脱液;
e 重新溶解:在40 ℃ 下用氮气将洗脱液吹至近干,然后用1 mL 40% 甲醇水溶液定容,供HPLC 分析
色谱条件:色谱柱:Diamonsil C18(2) 250 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99603) 色谱柱:Diamonsil C18(2) 250 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99603) 流动相:甲醇/ 水=40/60 (V/V) 流速:1 mL/min 进样量:20 μL 柱温:30 oC 检测器:UV 280 nm