对啊，只取0.5ml(定容至50ml)和取5ml到500ml到定容瓶的，两个同时进行，每个做了2个平行，但是吸光度差不多大。我还担心可能是温度的原因，还另取了4个做30度水浴，但是吸光度也没啥区别。
我也怀疑是自己取标液时不够准确，还叫另一个同事做了一遍，但是他的结果也是5这个点接近空白、偏低。

应助达人

斜率偏低一般是纳氏试剂没配好，或者是标液浓度配低了。

斜率偏低？请问斜率一般是多少？

按照楼主描述，应考虑0.5mL移液管的准确度。一般1mL以下的移液管，放液后底端残留也较多。一般对使用1mL及以下的移液管进行校准是必要的。通过校准结果，可以决定该移液管对最后一滴溶液的处理方式，如吹入？、停留15s？，停留20s？
其实选择几支校准好的2mL或2.5mL或5mL刻度吸管来加液，有时比使用0.5mL移液管还要好些（个人体会）。

应助达人

光程20mm，正常的斜率一般在0.0074-0.0081之间。

好的，谢谢您的建议。但是您所提到的建议（吹入最后一滴，使用刻度吸管等）我之前就已经试过了，还是不行啊。

纳氏试剂不行，显色能力弱了，导致低浓度点做不起来

我做了好几次，光程也是20mm，但是斜率都达不到你说的那个范围，都是0.0068-0.0072之间，相关系数都能达到三个九或者四个九，也不知道为什么，还有就是我们做的曲线斜率一般都偏小，即使新配的药。

应助达人

假如标准rongy没问题，斜率偏低两个原因，一是纳氏试剂没配好，二是仪器的灵敏度有问题。