应助达人

(6) 重复（5）的操作。，然后加入0.5 mL 氨水。混匀，作为上样液待净化。
SPE柱净化——ProElut PLS 60 mg/3 mL（Cat.#68003）
(1)活化： 依次加入3 mL 甲醇，3 mL 水，流出液弃去。
(2)上样： 将待净化液加入柱中，流出液弃去。
(3)淋洗： 依次用3 mL 水，5 mL 5%氨水（10%甲醇水）溶液淋洗，流出 液弃去，然后将PLS 柱抽干。
(4)洗脱： 3 mL10%氨水甲醇洗脱，流出液收集。
(5)重新溶解：* 将洗脱液在45 ℃减压浓缩至近干，然后用流动相重新定容至1mL。

SPE柱净化——ProElut PLS 60 mg/3 mL（Cat.#68003）
(1)活化： 依次加入3 mL 甲醇，3 mL 水，流出液弃去。
(2)上样： 将待净化液加入柱中，流出液弃去。
(3)淋洗： 依次用3 mL 水，5 mL 5%氨水（10%甲醇水）溶液淋洗，流出 液弃去，然后将PLS 柱抽干。
(4)洗脱： 3 mL10%氨水甲醇洗脱，流出液收集。
(5)重新溶解：* 将洗脱液在45 ℃减压浓缩至近干，然后用流动相重新定容至1mL。

SPE柱净化——ProElut PLS 60 mg/3 mL（Cat.#68003）
(1)活化： 依次加入3 mL 甲醇，3 mL 水，流出液弃去。
(2)上样： 将待净化液加入柱中，流出液弃去。
(3)淋洗： 依次用3 mL 水，5 mL 5%氨水（10%甲醇水）溶液淋洗，流出 液弃去，然后将PLS 柱抽干。
(4)洗脱： 3 mL10%氨水甲醇洗脱，流出液收集。
(5)重新溶解：将洗脱液在45 ℃减压浓缩至近干，然后用流动相重新定容至1mL。

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(1)活化： 依次加入3 mL 甲醇，3 mL 水，流出液弃去。
(2)上样： 将待净化液加入柱中，流出液弃去。
(3)淋洗： 依次用3 mL 水，5 mL 5%氨水（10%甲醇水）溶液淋洗，流出 液弃去，然后将PLS 柱抽干。
(4)洗脱： 3 mL10%氨水甲醇洗脱，流出液收集。
(5)重新溶解：* 将洗脱液在45 ℃减压浓缩至近干，然后用流动相重新定容至1mL。

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(1)活化： 依次加入3 mL 甲醇，3 mL 水，流出液弃去。
(2)上样： 将待净化液加入柱中，流出液弃去。
(3)淋洗： 依次用3 mL 水，5 mL 5%氨水（10%甲醇水）溶液淋洗，流出 液弃去，然后将PLS 柱抽干。
(4)洗脱： 3 mL10%氨水甲醇洗脱，流出液收集。
(5)重新溶解：* 将洗脱液在45 ℃减压浓缩至近干，然后用流动相重新定容至1mL。

SPE柱净化——ProElut PLS 60 mg/3 mL（Cat.#68003）

(1)活化： 依次加入3 mL 甲醇，3 mL 水，流出液弃去。

(2)上样： 将待净化液加入柱中，流出液弃去。

(3)淋洗： 依次用3 mL 水，5 mL 5%氨水（10%甲醇水）溶液淋洗，流出 液弃去，然后将PLS 柱抽干。

(4)洗脱： 3 mL10%氨水甲醇洗脱，流出液收集。

(5)重新溶解：* 将洗脱液在45 ℃减压浓缩至近干，然后用流动相重新定容至1mL。

色谱条件：色谱柱： Diamonsil C18(2) 250?4.6 mm，5 μm（Cat.#：99603） 流速： 0.7 mL/min 检测器：* 激发波长：225 nm 发射波长：285 nm 柱温： 30 ℃ 进样量： 20 μL 流动相： A（庚烷磺酸钠9 g/L，磷酸二氢钠1.54 g/L）：B（乙腈）=81:19

SPE柱净化——ProElut PLS 60 mg/3 mL（Cat.#68003）
(1)活化： 依次加入3 mL 甲醇，3 mL 水，流出液弃去。
(2)上样： 将待净化液加入柱中，流出液弃去。
(3)淋洗： 依次用3 mL 水，5 mL 5%氨水（10%甲醇水）溶液淋洗，流出 液弃去，然后将PLS 柱抽干。
(4)洗脱： 3 mL10%氨水甲醇洗脱，流出液收集。
(5)重新溶解：* 将洗脱液在45 ℃减压浓缩至近干，然后用流动相重新定容至1mL。

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(1)活化： 依次加入3 mL 甲醇，3 mL 水，流出液弃去。
(2)上样： 将待净化液加入柱中，流出液弃去。
(3)淋洗： 依次用3 mL 水，5 mL 5%氨水（10%甲醇水）溶液淋洗，流出 液弃去，然后将PLS 柱抽干。
(4)洗脱： 3 mL10%氨水甲醇洗脱，流出液收集。
(5)重新溶解：* 将洗脱液在45 ℃减压浓缩至近干，然后用流动相重新定容至1mL。

应助达人

恭喜获奖的老师。

今天的题没赶上