-
+关注
私聊
-
你一见我就笑2169
第21楼2018/07/23
你好，能否分享一下：不同PH值可能会决定某个物质出峰不出峰的相关事例或理论资料吗？
我之前的理解是：不同的方法结果不一致，是因为其中有一个方法不合理，要不分离度达不到要求，要不产品在该体系中不稳定。
前段时间，我确实遇到了你说的上述问题，改变了我的想法：有个产品，在TLC上可以看到一个很大的杂质峰，而在HPLC上确实看不到，一直不知道是什么原因？强保留在色谱柱上？（不太理解什么道理，使用纯有机相冲洗也未见杂质峰出现）。
某一次做完该产品（流动相体系是纯水和乙腈），更换另一个体系（流动相是0.1%磷酸水溶液和乙腈），发现有很高很宽的杂峰被冲洗出来，后续又验证过一次，是同样的现象。应该是该物质在中性体系里没有被冲洗出来，换成酸性体系才被冲洗出来的。我的理解是：即使中性体系里属于强保留，只要时间足够长，还是会被冲洗出来的。但事实上，连续运行该方法十多次也未见该峰出现……（可能还是因为我的知识储备不够吧~） 看到你的这种说法，再次让我回想起前段时间的这个被搁置的问题了。希望能从你这获取点相关知识，谢谢！夏天的雪(bingwang228) 发表:讨论的好激烈，谈一下个人的想法。由于用的是归一化法测定纯度，两个方法之间的重现性不好，可能还是与方法有关，一种可能是有组份没有完全分离，或者某些组份没有出峰；还有一种可能就是上述讨论的pH值对出峰的影响，不同pH值下有些物质能出峰，但是在另一个pH值可能就不出峰了，还有就是不同pH值下，峰型或者峰响应值有变化，从而也影响了结果
-
+关注
私聊
-
你一见我就笑2169
第22楼2018/07/23
很多物质是查不到pKa值的，尤其是一些中间体，因此选择pH值时就少了依据，只能根据经验和实验结果判断了。不知道你这里有没有更好的查找物质PKa值得方法？
你说的这个我明白，也看过一些相关资料。其实，从很多化合物的结构来看，经常会看到含有-COOH或-NH2，我能理解其在不同的pH值下以不同的形态存在，但是一直不能具体化，比如说：某个物质pKa为5，我选择PH为3的流动相体系，它具体是以哪种形式存在的？这种形式的结构式如何（与其结构式相比差异在哪？这个我没有一个直观的认识）？如果我选择pH为7或8的流动相体系，那么又是以什么样的具体形式存在？如若方便，烦请随便拿个例子（带-COOH或-NH2）说明一下即可，万分感谢！有水有渝(xky0230699) 发表:待测组分的理化性质可以咨询研发人员的，首先要保证待测组分在分析过程中以一种形式、稳定存在，不然分析结果无效。
-
+关注
私聊
-
夏天的雪
第23楼2018/07/24
应助达人实用高效液相色谱分析方法建立（中文版）.pdf 这本中有部分内容介绍了pH值的影响、流动相的影响，可以研读一下，里面也有一些实例
你一见我就笑2169(v2650137) 发表: 你好，能否分享一下：不同PH值可能会决定某个物质出峰不出峰的相关事例或理论资料吗？
我之前的理解是：不同的方法结果不一致，是因为其中有一个方法不合理，要不分离度达不到要求，要不产品在该体系中不稳定。
前段时间，我确实遇到了你说的上述问题，改变了我的想法：有个产品，在TLC上可以看到一个很大的杂质峰，而在HPLC上确实看不到，一直不知道是什么原因？强保留在色谱柱上？（不太理解什么道理，使用纯有机相冲洗也未见杂质峰出现）。
某一次做完该产品（流动相体系是纯水和乙腈），更换另一个体系（流动相是0.1%磷酸水溶液和乙腈），发现有很高很宽的杂峰被冲洗出来，后续又验证过一次，是同样的现象。应该是该物质在中性体系里没有被冲洗出来，换成酸性体系才被冲洗出来的。我的理解是：即使中性体系里属于强保留，只要时间足够长，还是会被冲洗出来的。但事实上，连续运行该方法十多次也未见该峰出现……（可能还是因为我的知识储备不够吧~） 看到你的这种说法，再次让我回想起前段时间的这个被搁置的问题了。希望能从你这获取点相关知识，谢谢！
-
+关注
私聊
-
夏天的雪
第24楼2018/07/24
应助达人体系切换出峰也是很正常的，很简单的例子，有些物质可能甲醇水下不出峰，或者出峰时间很晚，换成甲醇水酸性抑制条件下就能出峰了，可能是原先物质吸附在填料上不能被洗脱，也可能是构型不一样，波长不一样。有些物质在填料中是死吸附的，并不是强极性的物质都能被洗脱下来，如果都能完全洗脱下来，也不会出现柱效下降等现象了
你一见我就笑2169(v2650137) 发表: 你好，能否分享一下：不同PH值可能会决定某个物质出峰不出峰的相关事例或理论资料吗？
我之前的理解是：不同的方法结果不一致，是因为其中有一个方法不合理，要不分离度达不到要求，要不产品在该体系中不稳定。
前段时间，我确实遇到了你说的上述问题，改变了我的想法：有个产品，在TLC上可以看到一个很大的杂质峰，而在HPLC上确实看不到，一直不知道是什么原因？强保留在色谱柱上？（不太理解什么道理，使用纯有机相冲洗也未见杂质峰出现）。
某一次做完该产品（流动相体系是纯水和乙腈），更换另一个体系（流动相是0.1%磷酸水溶液和乙腈），发现有很高很宽的杂峰被冲洗出来，后续又验证过一次，是同样的现象。应该是该物质在中性体系里没有被冲洗出来，换成酸性体系才被冲洗出来的。我的理解是：即使中性体系里属于强保留，只要时间足够长，还是会被冲洗出来的。但事实上，连续运行该方法十多次也未见该峰出现……（可能还是因为我的知识储备不够吧~） 看到你的这种说法，再次让我回想起前段时间的这个被搁置的问题了。希望能从你这获取点相关知识，谢谢！
-
+关注
私聊
-
浪淘沙隐
第27楼2018/07/25
你可以去看看pKa与pH的关系，网上有很多的，很容易理解。
你一见我就笑2169(v2650137) 发表: 很多物质是查不到pKa值的，尤其是一些中间体，因此选择pH值时就少了依据，只能根据经验和实验结果判断了。不知道你这里有没有更好的查找物质PKa值得方法？
你说的这个我明白，也看过一些相关资料。其实，从很多化合物的结构来看，经常会看到含有-COOH或-NH2，我能理解其在不同的pH值下以不同的形态存在，但是一直不能具体化，比如说：某个物质pKa为5，我选择PH为3的流动相体系，它具体是以哪种形式存在的？这种形式的结构式如何（与其结构式相比差异在哪？这个我没有一个直观的认识）？如果我选择pH为7或8的流动相体系，那么又是以什么样的具体形式存在？如若方便，烦请随便拿个例子（带-COOH或-NH2）说明一下即可，万分感谢！