然而我们除了API基本上就是面积归一法定量，这样快捷方便，否则几十个杂质怎么定量。

应助达人

可以使用主成分自身对照法，会提供一点准确度，另外用外标法测定主成分含量。

我们这行业，一开始是不会使用自身对照法的，没那个时间，合成部门一分钟都不想等。

应助达人

做有机合成的研发确实是这样，归一化法是过程监测的最佳选择，那是不是可以考虑选择合适的检测波长，不一定是主成分的最大吸收波长，可以是杂质和主成分响应系数差不多的波长。另外选一个做的比较好的结果，做一次自身对照，作为标准参考，每次把浓度控制在这个标准参考的一定范围内，这个也可以提高准确度。当然不知道你们研发跟踪的误差要求，这个只能是长期的经验积累

主成分自身对照法，就是排除一个线性误差，而事实上，绝大多数方法的线性都很好，因此结果和归一化法的差异只是略有差异（完全在误差范围之内）。平时工作中，也多次就两者结果做过比较，也进一步证实了这个说法。

附件里已经更新了使用离子对试剂的结果，烦请查看。
还是想不通这个“杂质”和 MS的结果矛盾，是什么原因……

完全同意你这个看法。事实上我也是觉得国内对面积归一法有偏见。在研发早期，各个杂质或者无法得到对照品，或者杂质谱还未确定，并且合成部门也不需要得到太完美的杂质含量数据，所以面积归一法是首选。后期API如果和杂质响应差不多的话，其实完全可以继续使用面积归一法定量。

实际上，一开始合成并不需要太准确的数据，波长选择可以根据待测物及其前几步的中间体确定。

你这个离子对貌似用错了，一般碱性化合物用离子对，流动相pH应该调到酸性，试试10mM KH2PO4，pH3.0吧。另外你好几张图都没保留，出现双峰是非常正常的，先解决保留问题吧。

第四个方法是pH=8.3，当时纯属是因为这个流动相是其它项目的流动相，有现成的，就试了一下。
第五个条件，是最终选择的离子对的方法（昨天更新的附近图谱，烦请查看）。保留和峰形都有改善。“杂质”依旧在。
解决保留的问题（错误之处，还望加以补充和指正）：1、更换流动相和梯度； 2、变更温度、流速、色谱柱； 3、改用正相体系； 4、选用合适的离子对试剂。
现实情况：1、初始比例已经95：5了，甚至更换过水相柱，选用初始条件100%A，均无改善； 2、理论上效果不明显（未做实验）； 3、现实条件不允许； 4、已尝试（见附件方法5）
PS : 请教一下，为什么没有保留就容易出双峰？（我理解的是：单纯影响分离效果）。