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第14楼2018/12/08
1.反冲只针对填料粒径大于2um的色谱柱,小于2um的亚2um色谱柱不适合反冲,否则填料会流失。因为亚2um的色谱柱出口端筛板孔径小于填料粒径,但是入口端筛板孔径大于填料粒径,这么做是为了减小柱压,因为根据范德姆特方程,粒径越小,传质阻力越大,亚2um的色谱柱柱压本身就很大,入口端筛板孔径大一些可以减小阻力。但是反冲的话,填料就会被冲出来。
2.反冲的流速一般在最佳流速的50%为宜。
3.反冲可以使用缓冲盐,水,有机相交替进行,最好可以过夜冲洗。注意缓冲盐和有机相之间用水过度。
4.一些强保留物质需要适当添加SDS等表面活性剂或者盐酸胍等变性剂,才可以除去。