m3169744
第12楼2018/12/08
不是过载了,这是你的方法从根本上就走偏了。做标曲的时候很多人都会用同一浓度不同进样体积的方式来做,很简单,大部分时候还可以,但是这种方法从原理上讲是错误的方法,所以出现数据波动也是在所难免。
中国药典上写的清清楚楚,HPLC做标曲的时候应该是把样品稀释到不同浓度,按照统一进样体积进行分析,最终计算标曲。
为什么不同进样体积的方法是错误的?这是因为从根本上来讲,紫外检测器或者荧光检测器都是浓度型检测器,而不是质量型检测器。浓度型检测器的一个特点就是相应和物质的浓度成正比,而不是和物质的量成正比。如果不同体积下进样相同浓度,体积变大不大的情况下,色谱柱有浓缩作用,看似物质的量是成线性的。但是如果体积变大到一定程度,超过了色谱柱的浓缩能力,就会造成样品分散,最终造成检测器的响应值与实际进样量之间产生偏差。
所以不要用这种看似简单的偷懒方法,还是按照药典的要求认认真真的稀释样品才是正确的方法。
m3116636
第13楼2018/12/09
以前还真不是特别了解情况,你这么一说清楚啦,谢谢普及知识,会按照标准做的?(?????)?