是这样一种考虑，我的流速是2ml 16种出峰时间需要28分钟，用的pahs专用柱子，乙腈水流动相，紫外检测器。拿你现有的谱图来看是少一两个峰（如果最后一个不算目标峰），怀疑有两种情况，一是柱子分离效果不好，出峰很接近重叠了，调波长也看不到比较清楚的凸起和肩峰的情况；16种混标正常，另一种是峰没有出完全，之后还有目标峰

我设的流速是1 流动相也是乙腈和水 C18柱 差不多这14个峰在25分钟以内出完的 我整个的运行时间设到40的 但感觉后面一直都没有峰了

按照你自己的想法验证一下吧

我还想问一下 你用的紫外检测器是同一个波长测的还是设了不同波长的

先用的单波长，调洗脱条件，找到的所有的目标峰，大致定性，再变波长，使各种目标峰响应都可以。
红线17种加十氟联苯了

好的

这个呢，紫外检测器和荧光检测器采集的数据都要用，这个液相方法，先要体系平衡好，不然保留时间就会变，荧光检测器的采集发射光和激发光采集设置有好几组呢，不同时间下的参数采集，因此，平衡好了，就不会出现因为时间偏差导致有些峰采集不上，这个呢柱子是多环专用柱。前面轻组分回收率基本做不好，只有50%，后面重组份还行。前处理操作对实验结果影响也挺大。

你说的有两峰找不到，是因为荧光采集数据激发光和发射光都是有时间段的16种化合物被分到了几组参数里，比如前4种化合物在0-5Min内用的激发光是334发射光用的是360，后面时间段，参数就又变了，因为体系不稳定，导致在改出峰的时间点没出峰，当然就采集不到了，过了这个点又到了其他参数，这时候出峰，这个参数对这个峰没响应，就是你说的两峰没了。所以我说了运行前体系一定要稳定，最起码走一针标品，平衡一下体系，调整好采集时间段。后面基本就稳定了。

您这做出来使用的梯度多少

应助达人

换一个厂家的标品试试呢。