Insm_0cda6554
第23楼2019/05/13
说的非常好,谢谢您的答复,数据很有用,想问下有没有不同规格容量瓶的误差数据,此外我还有些疑问。
我的理解是:第一,减少稀释倍数,那么势必要增加稀释次数,而你小体积稀释倍数所换来的稍大规格管的小误差,会因多次相乘而增加误差。还以我的帖子的为例:①直接稀释法:取1ml至1000ml容量瓶,误差为1ml*100.7%*1000ug/ml除以1000ml,所得为1.007ug/ml。②逐级稀释法:先5ml于100ml容量瓶,再取所得液2ml于100ml容量瓶,误差为100.3%*100.5%,即约等于1.008ug/ml。即若不考虑容量瓶的误差,仍然是逐级稀释误差要大于1000倍直接稀释的误差。
当然,若是每次取10ml至100ml容量瓶,分三次逐级稀释:则误差为1.002的三次方,约为1.006;或者若是每次取100ml至1L容量瓶,分三次逐级稀释:则误差为1.0008的三次方,约为1.0024,小于一次稀释1.007,但是太不现实。
因此,我认为在不加入容量瓶规格的误差计算中,以上误差更多适用于一次稀释成功,即相同的倍数,例如稀释100倍,10ml至1L容量瓶误差要小于1ml至100ml容量。但是实际中要考虑所配试剂的用量,感觉有点脱离实际。
冰山
第26楼2019/05/29
我认为还有一个因素要考虑,就是吸取溶液的浓度。溶液的浓度越大,由吸取移液带来的误差也越大。一步稀释看起来简便,但是初始浓度很高,由此带来的误差不容低估
孤独求败
第28楼2019/06/21
先说结论:国标两步稀释法更优。
------------------
1mg/ml稀释1000倍,一步稀释:用1L的容量瓶。
国标分两步:第一步,取贮备液5ml于100ml容量瓶,所得为中间液。第二步,取中间液2ml于100ml容量瓶,所得为使用液,也就是先稀释20倍,再稀释50倍。
再来说取液误差:1ml是0.7%,2ml是0.5%,5ml是0.3%,10ml是0.2%,100ml是0.08%。
如果单从误差角度计算,一步稀释,1mL,误差按最大算,1.007ug/ml;两步稀释,按误差最大算约等于1.008ug/ml,
两步稀释误差略大,千分之一的误差。这个是理论值,实际操作中,这个误差可能更小。几乎可以忽略。
这个角度不足以证明国标方法好,我们换个角度分析
----------------------
一步稀释你要用1000mL,而两步稀释法,用200mL不到。
很显然,这个溶剂节省的更多。如果我们稀释用的溶剂是一个较昂贵的溶剂,那实验成本节省的很多。
误差差不不打,成本更节省,那国标的方法肯定更优一些。
Insm_0cda6554
第30楼2019/06/23
有道理,从溶剂节约的角度考虑。