也没少帮我忙 呵呵

梯度：首先要确认你们用的是几元泵，要多元泵才可以
梯度要看你做样品是否需要如果不需要没有必要使用

有机相逐渐减少不行吗

确实如你所说，和气相的升温程序一样，都是为了提高分离的效率。
所以，也不是所有的都要进行梯度洗脱才可以的，一般等度洗脱效果不好才考虑梯度。
每次梯度程序完成后，需要恢复到初始状态并达到稳定才可进行下次测定。
希望能对你有帮助。