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我是风儿
第12楼2020/08/11
应助达人硅胶固相萃取小柱的原理：LC—Si柱的硅胶表面含有大量的硅羟基，能够吸附极性化合物，通过调变适当的淋洗液和洗脱液，可以达到吸附特定化含物或杂质的目的。乙草胺在乙酸乙酯介质中与硅羟基反复发生吸附与解吸附过程(详见作用机理分析)，1mL提取液过柱时，当液面达到LC—Si柱顶端后才能继续加入正已烷淋洗液，以免形成涡流影响整体洗脱效果，过程中需保持溶剂浸润柱填料，不能干涸，以免柱中产生气泡或强吸附点使洗脱规律发生变化。GB23200.57-2016中，先用10mL正已烷淋洗，再用5mL乙酸乙酯+正已烷=3+97淋洗，再用5mL乙酸乙酯+正已烷(5+95)淋洗(淋洗液的极性逐渐增大)，再用15mL乙酸乙酯+正已烷(5+95)洗脱，收集洗脱液，绝大部分乙草胺在第6一22 mL流出。实验收集第6-21 mL流出液，很好地实现了乙草胺和杂质的分离。其中：弱极性杂质如油脂等大部分在2 mL左右就流出柱子，随后大量色素、酚类杂质开始流出，接着一些中强极性的杂质也被乙酸乙酯洗脱出来，大部分中强极性及偏弱极性的杂质都在5 mL以前流出，而强极性杂质则被吸附在柱填料上，能与乙草胺共流出的杂质量非常少，洗脱液均为无色透明液体。
详见作用机理分析： LC—Si柱／乙酸乙酯选择洗脱净化是本前处理方法的核心步骤。Lc-Si柱是经典的正相固相萃取柱，基于正相原理使杂质吸附于柱上，目标化合物随溶剂洗出，一般使用中等偏弱极性的溶剂洗脱。乙酸乙酯是极性较强的溶剂，在这种介质中，大量中强极性及弱极性杂质均难以保留而与目标化合物一起洗出，导致净化步骤失效。本实验正利用了在乙酸乙酯介质中大量杂质均难以保留的特点，使其先于乙草胺流出LC—Si柱，然后乙草胺在特定阶段流出再与仍然吸附于柱上的强极性杂质分离，达到了良好的净化效果。
值得注意的是：这个过程是在使用单一溶剂洗脱条件下实现的(目前的保留型固相萃取技术在洗脱步骤需要更换更强的溶剂)。在色谱柱洗脱过程中，经常还需要梯度洗脱来实现目标物的分离，而LC-Si固相萃取小柱以其极低的理论塔板数即可实现单一溶剂的选择洗脱。它必须同时满足两个条件：目标化合物的停留时间足够长以至于能够与绝大多数干扰基质明显分离；在不更换溶剂的情况下，目标化合物又能够被定量洗脱。
HLB固相萃取小柱 吸附剂是由亲脂性二乙烯苯和亲水性N-乙烯基吡咯烷酮两种单体按一定比例聚合成的大孔共聚物，其保留机理为反相，通过一个“特殊的极性捕获基团”来增加对极性物质的保留提供很好的水浸润性。
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问题123
第14楼2020/08/12
我是风儿(nphfm2009) 发表:硅胶固相萃取小柱的原理：LC—Si柱的硅胶表面含有大量的硅羟基，能够吸附极性化合物，通过调变适当的淋洗液和洗脱液，可以达到吸附特定化含物或杂质的目的。乙草胺在乙酸乙酯介质中与硅羟基反复发生吸附与解吸附过程(详见作用机理分析)，1mL提取液过柱时，当液面达到LC—Si柱顶端后才能继续加入正已烷淋洗液，以免形成涡流影响整体洗脱效果，过程中需保持溶剂浸润柱填料，不能干涸，以免柱中产生气泡或强吸附点使洗脱规律发生变化。GB23200.57-2016中，先用10mL正已烷淋洗，再用5mL乙酸乙酯+正已烷=3+97淋洗，再用5mL乙酸乙酯+正已烷(5+95)淋洗(淋洗液的极性逐渐增大)，再用15mL乙酸乙酯+正已烷(5+95)洗脱，收集洗脱液，绝大部分乙草胺在第6一22 mL流出。实验收集第6-21 mL流出液，很好地实现了乙草胺和杂质的分离。其中：弱极性杂质如油脂等大部分在2 mL左右就流出柱子，随后大量色素、酚类杂质开始流出，接着一些中强极性的杂质也被乙酸乙酯洗脱出来，大部分中强极性及偏弱极性的杂质都在5 mL以前流出，而强极性杂质则被吸附在柱填料上，能与乙草胺共流出的杂质量非常少，洗脱液均为无色透明液体。
详见作用机理分析： LC—Si柱／乙酸乙酯选择洗脱净化是本前处理方法的核心步骤。Lc-Si柱是经典的正相固相萃取柱，基于正相原理使杂质吸附于柱上，目标化合物随溶剂洗出，一般使用中等偏弱极性的溶剂洗脱。乙酸乙酯是极性较强的溶剂，在这种介质中，大量中强极性及弱极性杂质均难以保留而与目标化合物一起洗出，导致净化步骤失效。本实验正利用了在乙酸乙酯介质中大量杂质均难以保留的特点，使其先于乙草胺流出LC—Si柱，然后乙草胺在特定阶段流出再与仍然吸附于柱上的强极性杂质分离，达到了良好的净化效果。
值得注意的是：这个过程是在使用单一溶剂洗脱条件下实现的(目前的保留型固相萃取技术在洗脱步骤需要更换更强的溶剂)。在色谱柱洗脱过程中，经常还需要梯度洗脱来实现目标物的分离，而LC-Si固相萃取小柱以其极低的理论塔板数即可实现单一溶剂的选择洗脱。它必须同时满足两个条件：目标化合物的停留时间足够长以至于能够与绝大多数干扰基质明显分离；在不更换溶剂的情况下，目标化合物又能够被定量洗脱。
HLB固相萃取小柱 吸附剂是由亲脂性二乙烯苯和亲水性N-乙烯基吡咯烷酮两种单体按一定比例聚合成的大孔共聚物，其保留机理为反相，通过一个“特殊的极性捕获基团”来增加对极性物质的保留提供很好的水浸润性。
感谢风儿老师的解答，疑惑基本解决，剩下的是自己消化了，经常拜读您的原创，为我们的检测工作提供了指导性的建议。再次感谢您的解答。