我应该如何确定淋洗到位了,洗脱完全了?
我分析了一下可能发生的情况:
1.淋洗不足,杂质在下一步被洗脱到待测溶液里。
2.淋洗过度,目标物损失了。
3.洗脱不足,目标物还在小柱里。
4.洗脱过度,影响取决于第1条。
爱妃是你啊(Ins_0795fb7d) 发表:1,活化液的作用,我们通常拿到柱子是干的,除了一些特殊的,如免疫亲和柱,对于干的柱子,加入活化液,是为了去掉一些杂质,另一个是使我们的固定相的基团舒展开了,一般活化液为固定相相反极性。2,淋洗液,主要是淋洗掉那些被固定相同时吸附但不是我们目标物的物质。这个淋洗液既不能冲洗掉我们的目标物,又要冲洗掉一些固定相所吸附较弱的杂质。简单的来说就是在目标物与固定相之间的吸附力大于目标物在淋洗液中的作用力,杂质与固定相的吸附力小于杂质在淋洗液中的作用力,这样就能把杂质淋洗下来。3,洗脱液,将目标物从固定相所洗脱下来。收集,旋蒸或者氮吹,进行复溶。杂质较多的时候可以使用俩种或者多种不同种的柱子进行净化,尽可能的降低其它干扰,当然使用多个柱子,会拉长前处理时间,回收率存在不稳定因素增多等不方便之处。