不更换流动相保留时间相同，只要换流动相保留时间就变化了。因所跑图谱是用于注册，总共需要几百张，所以用同一瓶流动相做是不现实的。有柱温箱，但材料上并没有要求温度，柱温的影响会有这么大吗？现在的问题应该出在流动相的配制过程当中，请教大家怎样有效的解决这一问题

我觉得可能是流动相使用时的温度有关！

还是跟pH有关吧

改性剂浓度,ph值对保留时间影响还是很大的。
是不是醋酸盐或PH值改变的较大。

对头，pH对流动相的影响很大的。如果可以，可以做个实验，每次用冰乙酸调节酸度，使其前后一致。或者就一次多配些。你可以一次配1万毫升啊。呵呵。我觉得柱温箱可能也有影响，但不至于很大，如果能最好控制柱温箱的温度吧

样品保留时间为25分钟,时间太长了,建议你从新摸索流动相啊,你是不是每次都用隔天流下来的,有机相挥发点,影响会很大的哦 ,配比一定要准确

猜想一下：
楼主的流动相肯定一次配了很多，（因为注册样品很多？）大量流动相配制的时候，可能我们都会忽略其中体积的准确程度，是否同样采用了大容积的量筒？
还有，正如luoxiandong所说，我也认为流动相时间过长，也造成保留时间差异的一个因素。
但是，客观地说，绝对不应该影响到1分钟。
如果怀疑pH，可以监测一下每次pH 的变化，很快就会有方案解决了。