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肽类药物首先在强酸介质中水解为氨基酸并进行鉴别。在酸水解过程中部分氨基酸会降解,在这一过程中只有7种氨基酸是稳定的。随后水解产物在茚三酮衍生化后进行HPLC分析。然而使用HPLC和氨基酸分析仪进行氨基酸分析耗时且昂贵,并且对于不稳定的氨基酸只能给出半定量的结果。因此该HPLC方法对于通常的非天然氨基酸的降解和多肽上连接的功能小分子分析而言缺乏灵活性。 1 CAMAG CBS 101 中文版(2008 年 9 月) 为了进行多肽中游离氨基酸的痕量分析,多肽不能进行水解。当如此大量的多肽样品被注入色谱柱时,其在水相梯度洗脱时不断被冲洗下来从而影响色谱的分离。但在HPTLC分析时,由于多肽停留在原点或迁移至溶剂前沿,对于一次性使用的薄层板而言就不构成问题。因此这种优势使得HPTLC技术被选择用于该阶段的分析。最终确立了游离氨基酸的检测限以及多肽水解物中氨基酸的定量HPTLC分析方法。
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